Меню Рубрики

Подсчет ретикулоцитов крови при анемиях

Ретикулоциты – молодые эритроциты, образующиеся после потери нормобластами ядер. Характерной особенностью ретикулоцитов является наличие в их цитоплазме зернисто-нитчатой субстанции (ретикулума), представляющей агрегированные рибосомы и митохондрии.

1.) Подсчет количества ретикулоцитов в мазке после окраски их специальными красителями.

Данный метод является на практике наиболее используемым методом в связи с тем, что он простой, достаточно дешевый и не требует специального дорогостоящего оборудования, соответственно может применяться в любой клинико-диагностической лаборатории.

Принцип метода основан на выявлении зернисто-сетчатой субстанции ретикулоцитов при суправитальной окраске щелочными красками (насыщенный раствор бриллиантового крезилового синего в абсолютном спирте / раствор азура I /раствор азура II) с дальнейшим подсчетом их в мазке крови. Окраску ретикулоцитов проводят либо на стекле, либо в пробирке. Подсчет осуществляют с помощью микроскопа: приготовленные одним из указанных выше способов мазки микроскопируют с иммерсионным объективом; в мазке ретикулоциты и эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция в ретикулоцитах – в синий (при окраске азуром II и бриллиантовым крезиловым синим) или синевато-фиолетовый цвет (при окраске азуром I).

2.) Подсчет количества ретикулоцитов при помощи люминесцентной микроскопии.

Данный метод отличается простотой и требует немного времени, более точен по сравнению с обычным методом, так как при люминесцентной микроскопии обнаруживаются мельчайшие зерна сетчато-нитчатого вещества, однако он возможен только при наличии люминесцентного микроскопа и специальных красителей, в связи с чем доступен лишь немногим лабораториям.

Принцип подсчета количества ретикулоцитов при помощи люминесцентной микроскопии основан на использовании способности субстанции ретикулоцитов флюоресцировать после обработки крови акридиновым оранжевым. Кровь смешивают с акридиновым оранжевым в пробирке или смесителе в соотношении 1 часть крови и 10 частей краски (смесь можно хранить не более 5 часов). Смесь перемешивают в течение 2 минут, каплю смеси наносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. При этом жидкость не должна выходить за пределы покровного стекла.

Микроскопируют с помощью светофильтра ЖС-17. В препарате эритроциты имеют темно-зеленые очертания и не флюоресцируют, а в ретикулоцитах зернисто-сетчатая субстанция светится ярко-красным цветом, благодаря чему ретикулоциты легко подсчитать. В крови, стабилизированной гепарином или цитратом натрия, флюоресценции ретикулоцитов не наблюдается.

3.) Автоматический подсчет количества ретикулоцитов с помощью гематологического анализатора.

В современных гематологических анализаторах технология подсчета форменных элементов крови основана на кондуктометрическом методе, предложенном H. Wallace и Joseph R. Culter в 1947 г. Принцип метода заключается в подсчете числа и определении характера импульсов, возникающих при прохождении клетки через отверстие малого диаметра (апертуру), по обе стороны которого расположены два изолированных друг от друга электрода. Каждое прохождение клетки через апертуру сопровождается появлением электрического импульса, который регистрируется электронным датчиком. Разделение клеток по категориям (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, осадок) осуществляется прибором на основании анализа амплитуды полученных импульсов.Чтобы определить концентрацию клеток, достаточно пропустить определенный объем пробы через канал и подсчитать количество импульсов, которые при этом генерируются.

Следует обратить внимание на то, что помимо классического параметра ретикулоцитов — относительное (%) содержание ретикулоцитов (RET%, percent of reticulocytes), определяемого с помощью 1 и 2 методов лабораторной диагностики, в связи с появлением высокотехнологичных гематологических анализаторов (3 метод) стало возможным получать (например, с помощью запатентованного флюоресцентного красителя для анализатора Sysmex -XT- 2000i) дополнительные информативные ретикулоцитарные параметры:
• ретикулоциты с низким содержанием РНК, наиболее зрелые (LFR%, low fluorescence reticulocyte fractions, фракция ретикулоцитов с низкой флуоресценцией);
• ретикулоциты со средним содержанием РНК (MFR%, medium fluorescence reticulocyte fractions) — фракция ретикулоцитов со средней флуоресценцией);
• ретикулоциты с высоким содержанием РНК (HFR%, high fluorescence reticulocyte fractions) — фракция ретикулоцитов с высокой флуоресценцией);
• незрелая фракция ретикулоцитов (IRF%, Immature Reticulocyte Fraction).

Дифференцировка ретикулоцитов, основанная на степени зрелости и, соответственно, содержании нуклеиновых кислот, является отражением гемопоэтической активности костного мозга.

Методика (анализатор Sysmex -XT- 2000i). В проточной кювете клетки пересекают луч полупроводникового лазера, при этом происходит рассеивание луча под большим и малым углами и возбуждение флюоресцентного красителя. Это позволяет определять различные стадии зрелости ретикулоцитов по содержанию РНК в клетках и интенсивности их свечения. Автоматизированный подсчет ретикулоцитов отличается высокой точностью (подсчитывается более 30 000 эритроцитов) и воспроизводимостью (коэффициент вариации составляет около 6%). Данная технология обеспечивает точный подсчет ретикулоцитов даже при их предельно низких концентрациях.

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ — конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

источник

Ретикулоциты считают под иммерсионным объективом в ограниченном поле зрения, в прижизненно (без предварительной фиксации) окрашенных бриллиант-крезиловым синим мазках крови на 1000 эритроцитов. Сумма подсчитанных ретикулоцитов на 1000 эритроцитов является выражением их количества в промилле (‰). Норма ретикулоцитов 2-12 ‰ или 0,2 –1,2 %. Подсчет ретикулоцитов используется для оценки регенераторной способности костного мозга при анемиях (см. занятие №2). Повышение количества ретикулоцитов наблюдается у новорожденных, беременных женщин, на 4-6 сутки после острой кровопотери, при истинной полицитемии и т.д. Уменьшение количества ретикулоцитов возникает в результате токсического действия на костный мозг химических (бензол, антибиотики, сульфаниламиды, цитостатики), биологических (вирусные инфекции), физических (ионизирующее излучение) и др. факторов, которые нарушают процессы кроветворения.

Изучить классификации анемий, их этиологию, патогенез, клинические проявления и методы диагностики различных видов малокровия.

Задачи занятия – студент должен:

— основные виды классификаций анемий (по патогенезу, цветовому показателю, типу кроветворения, степени тяжести, способности костного мозга к регенерации, размеру эритроцитов);

— этиологию анемий, клинические проявления и механизмы их развития;

— лабораторные признаки различных видов анемий;

— определять количество эритроцитов в крови с помощью камеры Горяева;

— оценивать содержание гемоглобина в крови с помощью гемометра Сали;

рассчитывать цветовой показатель;

определять в мазках крови патологические формы эритроцитов;

— определить вид анемии в исследуемом образце крови.

— с современными методами диагностики анемий.

1. Анемии, определение понятия. Этиология. Принципы классификации.

2. Механизмы развития клинических симптомов при анемиях.

3. Постгеморрагические анемии. Особенности морфологических изменений периферической крови при острой и хронической кровопотере.

4. Железодефицитные анемии. Этиология, патогенез, диагностика Сидеропенический синдром. Понятие о сидероахрестических анемиях.

5. Этиология и патогенез В12— и (или) фолиеводефицитных анемий. Картина периферической крови. Болезнь Аддисона-Бирмера.

6. Гипо- и апластические анемии. Этиология, патогенез, диагностика.

7. Гемолитические анемии. Виды, причины, особенности клинических проявлений. Диагностика. Картина периферической крови. Гемолитическая болезнь новорожденных.

Анемия (или малокровие) — это патологическое состояние, характеризующееся уменьшением содержания эритроцитов и (или) гемоглобина в единице объёма крови. Развитие анемии часто сочетается с качественными изменениями эритроцитов, т.е. с изменением их формы (пойкилоцитоз), размера (анизоцитоз), содержания гемоглобина (анизохромия). Качественные изменения эритроцитов могут быть установлены как с помощью анализа эритроцитарных индексов (см. занятие №1), так и при непосредственной микроскопии мазка крови.

(по Литвицкому П.Ф., 1997 с дополнениями).

Первичные (наследственные, врожденные)

Дизэритропоэтические (железодефицитные, витаминодефицитные, гипо- и апластические, метапластические)

Нормоцитарные (≈ 7,2 — 8,3 мкм)

По цветовому показателю (ЦП)

По способности костного мозга к регенерации (по числу ретикулоцитов)

Недостаток Feв пище или повышение потребности в нём (беременность, лактация)

Поступление железа с пищей (15-18 мг/сут)

Взаимодействие FecHClжелудочного сока и активное всасывание энтероцитами кишечника

Нарушения всасывания железа

Недостаточность запасов Fe(недоношенность)

Клеточное Fe: миоглобин, железосодержащие ферменты

Депо Fe: печень, селезенка, костный мозг (ферритин, гемосидерин)

Перераспределение Fe(злокач. опухоли)

Клетки макрофагально-фагоцитарной системы:

Нарушение утилизации железа (отравление Pb)

Физиологические потери железа

С калом, потом, мочой, слущивающимся эпителием; у женщин также -menses, лактация

Повышение потери железа физиологическими путями

Рис. 2. Обмен железа и патогенез железодефицитных анемий

В периферической крови при железодефицитных анемиях отмечается понижение содержания эритроцитов, уменьшение уровня гемоглобина, снижение цветового показателя (гипохромная анемия). Наблюдается пойкилоцитоз и анизоцитоз с преобладанием микроцитоза (эритроциты выглядят в виде колец). Количество ретикулоцитов чаще снижается (гипорегенераторная анемия). Отмечается уменьшение содержания железа в сыворотке (сидеропения). Содержание лейкоцитов может уменьшаться за счет нейтрофилов (нейтропения). Количество тромбоцитов в норме.

Схожими с железодефицитными анемиями являются порфиринодефицитные (сидероахрестические) анемии. Они развиваются при нарушении включения железа в гем из-за низкой активности ферментов, участвующих в синтезе порфиринов, которые входят в состав гема. Порфирины также являются обязательными компонентом каталазы, пероксидаз, цитохромов, а также миоглобина. Порфиринодефицитные анемии могут быть наследственными (сцепленные с Х-хромосомой или аутосомой) и приобретенными (интоксикация свинцом, дефицит витамина В6). Нарушение включения железа в гем приводит к увеличению уровня железа в плазме крови (до 80-100 мкмоль/л) и накоплению его в печени, надпочечниках, поджелудочной железе, что нарушает их функции.

Особое место занимают анемии, связанные с дефицитом витамина В12 и (или) фолиевой кислоты.

Витамин В12-дефицитная анемия (пернициозная, злокачественная, болезнь Аддисона-Бирмера) впервые описана Аддисоном (1849 г.), затем Бирмером (1872 г.). Причинами В12 -дефицитных анемий могут быть 1) недостаточное поступление витамина В12 (цианокобаламина) в организм с продуктами питания (мясо, яйца, сыр, печень, молоко), 2) нарушение усвоения витамина В12 в организме (рис. 6). В выше указанных продуктах цианокобаламин или «внешний фактор» (по предложению Кастла, 1930 г.) связан с белком. В желудке, в результате протеолиза, витамин В12 освобождается от белка и связывается с синтезируемым париетальными клетками гликопротеином («внутренним фактором»), что позволяет образовавшемуся комплексу всасываться в тонкой кишке. Запасы витамина В12 в организме составляют около 2 — 5 мг. При прекращении экзогенного поступления цианокобаламина их достаточно на 3 — 6 лет. Нарушение усвоения витамина В12 в организме может возникнуть при хронических атрофических заболеваниях желудка и тонкого кишечника, состояниях после резекции данных органов, «конкурентного» использования цианокобаламина паразитами (широкий лентец) и микроорганизмами.

Витамин В12 имеет две коферментные формы: метилкобаламин и 5-дезоксиаденозилкобаламин. Метилкобаламин участвует в образовании из фолиевой кислоты (фолата) тетрагидрофолиевой (тетрагидрофолата), необходимой для образования тимидинмонофосфата, синтеза глутаминовой кислоты, пуриновых и пиримидиновых оснований. Тимидинмонофосфат включается в ДНК эритрокариоцитов, обеспечивая нормобластический тип кроветворения в красном костном мозге, а также в ДНК других быстропролиферирующих клеток (эпителий кишечника, семенных канатиков). 5-дезоксиаденозилкобаламин регулирует синтез жирных кислот, катализируя превращение метилмалоновой кислоты в янтарную, что необходимо для образования миелина.

Недостаток витамина В12 приводит к нарушению синтеза и структуры ДНК, что уменьшает количество митозов в эритропоэзе. В результате клетки эритроидного ростка увеличиваются в размерах (мегалобласты и мегалоциты), резко уменьшается их количество и продолжительность жизни из-за низкой резистентности. Одновременно нарушается созревание клеток других ростков миелопоэза (мегакариоцитарного, миелоцитарного), что приводит к тромбоцитопении и лейкопении. Замедление дифференцировки ядра по сравнению с накоплением гемоглобина в клетке приводит к появлению в зрелых эритроцитах остатков ядерного вещества (тельца Жолли) и нуклеолеммы (кольца Кебота). Витамин В12-дефицитные анемии отличаются очень низким содержанием эритроцитов (1,0-0,8 х 10 12 /л) и гемоглобина (50-27 г/л). Цветовой показатель превышает единицу, достигая 1,4-1,8 (гиперхромная анемия). Характерны анизоцитоз и пойкилоцитоз. Количество ретикулоцитов обычно понижено, они появляются лишь в период ремиссии.

При В12-дефицитных анемиях развиваются нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта (глоссит и формирование «полированного» языка вследствие атрофии его сосочков, стоматит, гастроэнтероколит), которые обусловлены нарушением деления и созревания эпителиоцитов слизистой. Дифференциально-диагностическим признаком с фолиеводефицитной анемией является появление при В12-дефицитной анемии неврологического синдрома, вызванного нарушением образования миелина: психические расстройства (бред, галлюцинации), признаки фуникулярного миелоза (шаткая походка, парестезии, болевые ощущения). Неврологический синдром обусловлен дефицитом 5-дезоксиаденозилкобаламина.

Фолиеводефицитные анемии. Соединения фолиевой кислоты (фолаты) содержатся в большом количестве в печени, мясе, дрожжах, шпинате. При дефиците поступления запасы ее в организме исчерпываются в течение 3-4 мес. Всасывается фолиевая кислота в основном в верхнем отделе тонкой кишки. Коферментная форма фолиевой кислоты – тетрагидрофолевая — необходима для образования тимидинмонофосфата, синтеза глутаминовой кислоты, пуриновых и пиримидиновых оснований. Дефицит фолиевой кислоты в организме приводит к нарушениям, схожим с теми, которые наблюдаются при В12-дефицитной анемии. Однако в клинической картине отсутствует неврологический синдром (см. патогенез В12-дефицитных анемий). Установлено, что дефицит фолиевой кислоты приводит к увеличению концентрации гомоцистеина в крови, что способствует развитию атеросклероза.

Читайте также:  Фолиевая кислота с чем принимать при анемии

Поступление витамина В12с пищей

Недостаток витамина В12в пище

Взаимодействие витамина В12cвнутренним фактором Кастла (гастромукопротеид)

Нарушения всасывания витамина В12

Активное всасывание витамина В12с участием белка-акцептора (транскобаламинаII)

Почки, мышцы, сердце и другие органы и ткани

Депонирование и утилизация витамина В12(протеин-кобаламин)

Активация фолата в тетрогидрофолат

Транспорт витамина В12(транскобаламинII,IиIII)

Недостаточность запасов витамина В12

Тетрогидрофолат пуриновые, пиримидиновые основаниясинтез ДНК

Нарушение утилизации витамина В12

Повышение потери витамина В12физиологическими путями

Физиологические потери витамина В12

С калом, мочой, слущивающимся эпителием; у женщинтакже -menses, лактация

Гипо- и апластические анемии развиваются вследствие подавления миелопоэза в костном мозге при воздействии на него физических, химических, биологических факторов, а также наличия наследственных дефектов гемопоэтических клеток. Физические (ионизирующее излучение), химические (левомицетин, бутадион, цитостатики), биологические (вирусы) факторы нарушают синтез ДНК, физико-химическое микроокружение стволовых клеток, либо иммунологическую толерантность к ним. При наследственной апластической анемии (анемия Фанкони) наблюдается дефект гемопоэтических клеток, наследуемый по аутосомно-рецессивному механизму, вследствие которого нарушаются процессы репарации ДНК.

При гипо- и апластических анемиях нарушается пролиферация стволовых клеток и образование зрелых форменных элементов периферической крови – наблюдается панцитопения. Количество лимфоцитов часто остается нормальным. Содержание гемоглобина в эритроцитах близко к норме (нормохромная анемия), однако общее содержание Hb резко снижено (до 20-30 г/л). Количество ретикулоцитов снижено или они отсутствуют (гипо- или арегенераторная анемия). Клинически выявляются признаки гипоксии, тромбоцитопении и снижения свертываемости крови (кровоизлияния), лейкопении (склонность к развитию инфекционных процессов).

Большую группу анемий составляет гемолитические анемии. Данные анемии чаще встречаются в детском возрасте. Главным патогенетическим фактором в возникновении этого вида анемии является укорочение срока жизни эритроцитов и преобладание процесса разрушения эритроцитов над их продукцией. Они сопровождаются желтухой вследствие избытка в крови и отложения в тканях непрямого билирубина. По цветовому показателю гемолитические анемии являются гипо- или нормохромными, реже — гиперхромными. Они относятся к регенераторным анемиям с нормобластическим типом кроветворения.

По этиологии различают первичные (наследственные, врожденные) и вторичные (приобретенные) гемолитические анемии.

Наследственные гемолитические анемии возникают в результате наследования: 1) патологических типов гемоглобинов (гемоглобинопатии), 2) дефектов структуры мембран эритроцитов (мембранопатии) и 3) дефицита ферментов (ферментопатии).

Гемоглобинопатии. Гемоглобин представляет собой гетеродимерный тетрамер, состоящий из двух цепей глобина типа α и двух цепей другого типа (β, γ или δ), соединенных с четырьмя молекулами гема. К нормальным типам гемоглобина относятся: HbA (α2β2 – основной гемоглобин взрослого), HbF (α2γ2 – фетальный гемоглобин) и HbA22δ2 – минорный гемоглобин взрослого). Известно более 50 патологических типов гемоглобинов. Наиболее часто встречаются серповидно-клеточная анемия и талассемия (средиземноморская анемия).

Серповидно-клеточная анемия – заболевание, связанное с синтезом патологического гемоглобина S. Данная гемоглобинопатия наиболее распространена у лиц проживающих в «малярийном поясе» (Средиземноморье, Средняя Азия, Америка, Африка, центральная Индия), поскольку гетерозиготы относительно устойчивы к малярийному плазмодию. Гемоглобин S образуется в результате точечной мутации в гене β-цепи, приводящей к замене в 6-м положении глутамина на валин. Гемоглобин S приводит к деформации (клетки похожи на серп — дрепаноциты) и гемолизу эритроцитов. Средняя продолжительность жизни эритроцитов у больных, гомозиготных по гемоглобину S, составляет около 17 дней. Деформированные серповидные эритроциты, взаимодействуя с тромбоцитами, эндотелием, коагуляционными белками, вызывают нарушение микроциркуляции вплоть до закупорки микрососудов. Болевые (вазоокклюзионные) приступы могут возникать в области спины, груди, живота, длинных трубчатых костей. Тканевая гипоксия и микроинфаркты могут вызвать острую патологию любой системы организма. По регенераторной способности костного мозга серповидно-клеточная анемия является гиперрегенераторной (количество ретикулоцитов – около 10% или ≈100‰).

Талассемия – это наследственная анемия, для которой характерно снижение или полное отсутствие синтеза α- или β-цепей глобина (соответственно α- или β-талассемия). Компенсаторно усиливается синтез той цепи глобина, генетическая информация которой не изменена. Вследствие несбалансированного накопления α- или β-цепей глобина возникают преципитаты гемоглобина и содержащие их эритроциты удаляются клетками макрофагально-фагоцитарной системы. Возникает гипохромная микроцитарная анемия.

К мембранопатиям относятся гемолитические анемии, обусловленные генетическим дефектом белковой или липидной структуры мембраны эритроцитов. К первым (белковозависимым мембранопатиям) относят наследственный микросфероцитоз (болезнь Минковского-Шаффара), элиптоцитоз (овалоцитоз), стоматоцитоз; ко вторым (липидозависимым мембранопатиям) — наследственный акантоцитоз.

Болезнь Минковского-Шаффара (микросфероцитоз) наследуется аутосомно-доминантно. Мембранопатия обусловлена снижением содержания и изменением структуры белков спектрина и анкерина, нарушением взаимодействия их с другими белками мембраны эритроцита, что приводит к повышению ее проницаемости, гипергидратации клеток. Эритроциты приобретают сферическую форму, при этом уменьшается их диаметр (до 5,4 мкм) – развивается микросфероцитоз. Снижение деформируемости микросфероцитов приводит к их гемолизу в синусоидах селезенки (развивается спленомегалия). Продолжительность жизни микросфероцитов равна 8-15 дням.

Элиптоцитоз (овалоцитоз) также наследуется аутосомно-доминантно. Образуются эритроциты овальной или элиптической формы (до 25-75% от общего количества эритроцитов).

Стоматоцитоз – появление в периферической крови эритроцитов с поперечной щелью, что напоминает рот (от греч. stoma — рот).

Акантоцитоз наследуется аутосомно-рецессивно. Эритроциты имеют выпячивания мембраны различного размера (шпоровидные клетки). Их появление связано с синтезом аномальных липопротеинов плазмы и эритроцитарной мембраны.

При гемоглобинопатиях и мембранопатиях преобладает внесосудистый (внутриклеточный) гемолиз. При данных видах гемолитических анемий уменьшается деформируемость эритроцитов, т.е. они становятся ригидными, мало эластичными. Проходя с трудом по микроциркуляторному руслу, они повреждаются, захватываются макрофагами селезенки и печени и подвергаются преждевременному гемолизу.

Ферментопатии обусловлены дефектом ряда ферментных систем в эритроцитах (гликолиз, пентозомонофосфатный цикл, система глутатиона). Известно более 20 ферментопатий, приводящих к преждевременному гемолизу эритроцитов. Ферментопатии, связанные с нарушением гликолиза, могут возникать при наследственном дефиците пируваткиназы, гексокиназы, фосфофруктокиназы и др. Недостаток АТФ обусловливает нарушение трансмембранных ионных градиентов, гипергидратацию, набухание и гемолиз эритроцитов.

Наиболее часто наблюдается дефицит ферментов пентозомонофосфатного цикла (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и др.). При торможении пентозомонофосфатного цикла нарушается образование НАДФ*Н, который необходим для восстановления глутатиона. Последний при участии глутатионпероксидазы обеспечивает антиоксидантную защиту эритроцита, нейтрализуя органические и неорганические перекиси. У больных с недостаточностью глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы прооксидантный эффект инфекции, ацидоза, определенных лекарственных препаратов и токсинов приводит к преципитации гемоглобина (в эритроцитах появляются включения – тельца Гейнца) и внутрисосудистому гемолизу.

Приобретенные гемолитические анемии обусловлены преимущественно внутрисосудистым гемолизом эритроцитов вследствие повреждения их мембраны различными агентами. Причинами приобретенных гемолитических анемий могут быть физические (искусственные клапаны, «маршевая» гемоглобинурия, ожоги, введение гипотонических растворов), химические («гемолитические яды» — соединения свинца, мышьяка, фосфора, фенилгидразин, нитробензол, нитриты, сульфаниламиды), биологические (грибной, змеиный, пчелиный яды, эндо- и экзотоксины гемолитического стрептококка, стафилококков, малярия, переливание несовместимой крови, резус-конфликт матери и плода) факторы.

Особое место среди анемий занимает врожденная гемолитическая анемия вследствие резус-конфликта матери и плода (гемолитическая болезнь новорожденных). Гемолитическая болезнь новорожденных может возникнуть, если плод наследует от отца резус-положительный фактор, а мать является резус-отрицательной. В организме матери при попадании резус-антигена (предыдущая беременность резус-положительным плодом, переливание резус-положительной крови) накапливаются антитела против резус-фактора (сенсибилизация). Антитела, попадая через плаценту в кровь плода, вызывают разрушение его эритроцитов. Возможно также развитие подобного заболевания при несовместимости крови матери и ребенка по другим групповым системам крови (наибольшее значение имеет система АВ0). Гемолитическая болезнь новорожденных при АВ0-несовместимости встречается чаще, но протекает намного легче, чем при резус-конфликте.

П р а к т и ч е с к а я р а б о т а

Работа 1. Подсчет количества эритроцитов у кроликов с постгеморрагической анемией.

Ход работы: у кролика из краевой вены уха получаем каплю крови, в которую погружаем кончик смесителя для подсчета эритроцитов и набираем кровь до метки 0,5. Разводим 3% р-м хлорида натрия до метки 101 (разведение в 200 раз). Смеситель аккуратно встряхиваем 5 мин. Покровное стекло притираем к краям камеры Горяева до появления ньютоновских колец. В связи с тем, что жидкость в капилляре не участвует в разведении крови первые 2 капли из смесителя выдуваем на ватку и следующей каплей заполняем камеру. Подсчет эритроцитов проводим в 5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких (т.е. в 80 маленьких квадратах), расположенных по диагонали. Количество эритроцитов рассчитываем по формуле:

или А10 4 /мкл (А10 10 /л), где

X – содержание эритроцитов в 1 л крови,

А – сумма эритроцитов, подсчитанных в 5 больших квадратах,

200 – разведение крови в меланжере,

4000 – количество маленьких квадратов в камере Гаряева, 80 – количество маленьких квадратов, в которых производился подсчет,

10 6 – коэффициент для пересчета 1 мкл (объем камеры Гаряева) на 1 л.

Работа 2. Определение содержания гемоглобина в крови по методу Сали.

Ход работы: в градуированную пробирку гемометра Сали наливаем 0,1 н р-р НСl до нижней круговой метки. Сухой капиллярной пипеткой набираем 20 мкл крови и осторожно выдуваем в градуированную пробирку. После этого пипетку несколько раз промываем НСl из прозрачного верхнего слоя. Смесь хорошо перемешиваем и оставляем на 5 минут до образования темно-коричневого окрашивания, связанного с образованием хлорида гематина. Затем осторожно прибавляем дистиллированную воду до одинакового цвета со стандартом. По шкале пробирки гемометра определяем содержание гемоглобина в крови в г% (г/л).

Зная количество эритроцитов в I л крови и содержание Нb производим расчет цветового показателя (ЦП).

На основании полученных результатов делаем вывод о степени тяжести анемии, ее классификации по цветовому показателю.

Работа 3. Микроскопия и зарисовка мазков крови с хронической постгеморрагической анемией.

Выявляем наиболее типичные для хронической постгеморрагической анемии признаки (гипохромию, микроцитоз, пойкилоцитоз) и зарисовываем их в тетради для практических работ.

З а н я т и е № 3. КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ И КАЧЕСТВЕННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ. ЛЕЙКОЦИТОЗЫ. ЛЕЙКОПЕНИИ.

Повторить стадии и механизмы лейкопоэза, функциональную роль лейкоцитов в организме. Изучить основные причины и механизмы лейкоцитозов и лейкопений.

Задачи занятия – студент должен:

стадии созревания и функции различных видов лейкоцитов;

лейкоцитарную формулу периферической крови взрослого и детского организма, причины ее нарушений;

этиология, механизмы развития и классификацию лейкоцитозов;

причины, виды, механизмы развития и последствия лейкопений.

подсчитать лейкоцитарную формулу в мазке крови;

дать заключение лейкоцитарной формулы;

оценить вид ядерного сдвига в лейкоцитарной формуле;

подсчитать индекс ядерного сдвига и интерпретировать полученные результаты.

с качественными изменениями лейкоцитов при лейкоцитозах и лейкопениях.

источник

Определение количества ретикулоцитов – клинический анализ крови, при котором осуществляется подсчет молодых эритроцитов, производимых костным мозгом. Исследование дополняет общий анализ крови. Подсчет ретикулоцитов выполняется для дифференциальной диагностики различных типов анемий, оценки функционирования костного мозга и селезенки, мониторинга состояний пациентов с железодефицитом, дефицитом витамина В12 или фолиевой кислоты, почечной недостаточностью, онкологическими заболеваниями. Забор крови для исследования производится из вены или капилляров. Показатель ретикулоцитов определяется при помощи метода проточной цитофлуориметрии. Референсные значения для мужчин – 23-70 тыс/мкл, для женщин – 17-63,8 тыс/мкл. Сроки выполнения анализа не превышают 1 рабочего дня.

Определение количества ретикулоцитов – клинический анализ крови, при котором осуществляется подсчет молодых эритроцитов, производимых костным мозгом. Исследование дополняет общий анализ крови. Подсчет ретикулоцитов выполняется для дифференциальной диагностики различных типов анемий, оценки функционирования костного мозга и селезенки, мониторинга состояний пациентов с железодефицитом, дефицитом витамина В12 или фолиевой кислоты, почечной недостаточностью, онкологическими заболеваниями. Забор крови для исследования производится из вены или капилляров. Показатель ретикулоцитов определяется при помощи метода проточной цитофлуориметрии. Референсные значения для мужчин – 23-70 тыс/мкл, для женщин – 17-63,8 тыс/мкл. Сроки выполнения анализа не превышают 1 рабочего дня.

Ретикулоциты – предшественники эритроцитов. Они производятся костным мозгом при дифференцировке и делении стволовых клеток. Большая часть ретикулоцитов находится в костном мозге, в кровоток в основном попадают уже зрелые эритроциты. Доля ретикулоцитов в крови – около 0,5-2%. При выполнении анализа определяется количество клеток этого типа и их процент от общего числа эритроцитов. Результаты позволяют оценить производство красных кровяных клеток в костном мозге, выявить степень активности этого процесса.

Читайте также:  Сестринский диагноз при железодефицитной анемии

Организмом поддерживается стабильный уровень эритроцитов в крови. При снижении их количества в результате гемолиза, нарушения синтеза, кровотечения включаются компенсаторные механизмы восстановления нормальной концентрации. По изменению уровня и процента ретикулоцитов можно установить усиление производства красных кровяных клеток в костном мозге или угнетение этого процесса. Если костный мозг функционирует нормально, то потеря эритроцитов приводит к последующему увеличению их количества и количества ретикулоцитов. Понижение уровня этих типов клеток происходит при поражении красного костного мозга опухолью, метастазами, лучевой терапией и химиотерапией. Для проведения анализа на ретикулоциты биоматериалом является капиллярная или венозная кровь. Исследование выполняется с помощью гематологического анализатора методом проточной цитометрии. Результаты применяются в общетерапевтической практике, в гематологии, педиатрии, инфекционистике, хирургии.

Анализ на ретикулоциты используется для оценки производства эритроцитов костным мозгом. Результаты исследования позволяют дифференцировать различные виды анемий. По уровню ретикулоцитов они подразделяются на гипорегенераторные и регенераторные. В первом случае показатели теста снижены, производство эритроцитов недостаточное, функции костного мозга угнетены. К этой группе относятся гемолитические анемии при хронических заболеваниях, общей интоксикации, кахексии, дефиците белков, железа, витаминов. Регенераторные анемии сопровождаются компенсаторным повышением уровня ретикулоцитов на фоне усиленного разрушения или потери эритроцитов. К этой группе относятся постгеморрагические и некоторые гемолитические анемии. Анализ на ретикулоциты может использоваться для установления тяжести анемии, тогда его результаты дополняются показателями уровня эритроцитов, гемоглобина и эритроцитарными индексами.

Определение уровня ретикулоцитов показано при сниженном уровне эритроцитов, гемоглобина, при жалобах на частую усталость, головные боли, одышку, кровь в моче или стуле. При установленном диагнозе анемии анализ назначается с целью оценки эффективности лечения. Особенно часто он используется для мониторинга анемий, вызванных дефицитом железа, витамина B12 или фолиевой кислоты, а также развивающихся на фоне почечной недостаточности, хронических заболеваний. Для исследования функции костного мозга тест на ретикулоциты показан при повышенном уровне эритроцитов, для определения причины полицитемии.

Анализ на ретикулоциты в крови не используется для установления диагноза. Его основное назначение в клинической практике – составление плана дальнейших диагностических процедур и контроль успешности терапии. Количество ретикулоцитов в крови относительно стабильно, поэтому при снижении уровня эритроцитов и гематокрита показатели анализа становятся искусственно завышенными. Избежать этого помогает расчет ретикулоцитарного индекса – абсолютного числа ретикулоцитов (процент ретикулоцитов умноженный на показатель гематокрита). Еще одной особенностью данного исследования является то, что результаты указывают на недавнюю активность костного мозга, так как незрелые эритроциты циркулируют в крови в течение 2 дней.

Кровь для анализа на ретикулоциты рекомендуется сдавать с утра, натощак. Минимальный промежуток между приемом пищи и процедурой – 3-4 часа. Не менее чем за сутки необходимо отказаться от интенсивных физических нагрузок, употребления алкоголя, избегать воздействия стрессовых факторов. При назначении анализа стоит сообщить врачу об используемых лекарствах, так как некоторые препараты влияют на уровень ретикулоцитов в крови. За 30 минут до процедуры забора нужно отказаться от курения, исключить физическое и эмоциональное напряжение.

Уровень ретикулоцитов определяется в капиллярной или венозной крови. Соответственно забор производится из безымянного пальца или из локтевой вены. Кровь помещается в пробирку с антикоагулянтом и направляется в лабораторию. В настоящее время для подсчета ретикулоцитов практически везде используются гематологические анализаторы. Исследование выполняется методом проточной цитометрии – клетки в потоке жидкости перемещаются через очень узкий капилляр и учитываются при облучении лазером. Сроки исполнения анализа – 1 день.

В результатах анализа на ретикулоциты отображается абсолютное число клеток в единице объема крови и процент от общего количества эритроцитов. В норме у пациентов женского пола уровень ретикулоцитов составляет от 17*109 до 63,8*109 клеток/л, у пациентов мужского пола – от 23*109 до 70*109 клеток/л. Доля клеток этого типа в общем количестве эритроцитов изменяется с возрастом:

  • с рождения до 2 недель – от 0,15 до 1,5%;
  • с 2 недель до 1 месяца – от 0,45 до 1,4%;
  • с 2 до 6 месяцев – от 0,25 до 0,9%;
  • с 6 месяцев до 2 лет – от 0,2 до 1%;
  • с 2 до 6 лет – от 0,2 до 0,7%;
  • с 6 до 12 лет – от 0,2 до 1,3%;
  • с 12 до 18 лет – от 0,12 до 2,05% для девушек, от 0,24 до 1,7% для юношей;
  • с 18 лет – от 0,59 до 2,07% для женщин, от 0,67 до 1,92% для мужчин.

Физиологическое повышение уровня ретикулоцитов в крови происходит при кислородном голодании, вызванном подъемом на большую высоту или спуском под воду, длительным пребыванием в непроветриваемом помещении, курением, приемом алкоголя. Кроме этого, увеличение концентрации данных клеток иногда определяется у беременных и рассматривается как вариант нормы.

Причиной повышения уровня ретикулоцитов в крови может быть кровотечение. Концентрация эритроцитов снижается, чтобы ее восстановить, костный мозг увеличивает продукцию их предшественников. При остром кровотечении количество ретикулоцитов возрастает на 3 или 4 день, при хроническом – остается стойко повышенным все время. При заболеваниях сопровождающихся гемолизом (разрушением эритроцитов) показатель ретикулоцитов значительно превышает норму, иногда отклонения достигают 300%. Наиболее распространенные патологии этой группы – наследственные дефекты эритроцитов, их аутоиммунное разрушение, токсическое поражение при малярии. Другими причинами повышения уровня ретикулоцитов могут быть полицитемии, воспалительные процессы, рак костного мозга или распространение метастазов в него, восстановление функций костного мозга после лучевой и химиотерапии. При лечении анемий нормализация концентрации ретикулоцитов свидетельствует об успешности терапевтических мероприятий.

Причиной снижения уровня ретикулоцитов в крови могут быть анемии, вызванные дефицитом железа, витамина B12 или фолиевой кислоты. В таких случаях производство клеток крови сокращается из-за недостатка «строительного материала». Другой причиной снижения уровня ретикулоцитов являются анемии, развивающиеся на фоне поражений костного мозга или угнетения его функций. Изменения такого типа определяются при алкогольной интоксикации, снижении активности щитовидной железы, хронических инфекциях, аутоиммунных патологиях, заболеваниях почек, воздействии токсических веществ, в том числе лекарственных препаратов, облучении.

В клинической практике тест на ретикулоциты чаще всего назначается после общего анализа крови при снижении показателей эритроцитов и гемоглобина. Уровень ретикулоцитов позволяет оценить функции костного мозга, синтез эритроцитов, определить тип анемии, отслеживать эффективность ее лечения. Если результаты исследования отклоняются от нормальных, стоит обратиться за консультацией к лечащему врачу – терапевту, педиатру, гематологу, хирургу. Чтобы предупредить влияние физиологических факторов на количество ретикулоцитов, необходимо исключить ситуации, вызывающие кислородное голодание – подъемы на высоту или спуски под воду, длительное пребывание в загазованном или душном помещении, курение, употребление алкоголя.

источник

Ретикулоциты в крови составляют небольшое количество, однако они важны тем, что из них образуются эритроциты. Уровень ретикулоцитов в периферической крови является прямым отражением регенераторных возможностей костного мозга. Снижение показателя ретикулоцитов (RET) носит название ретикулоцитопении и выявляется при сдвигах в костном мозге апластического или гипопластического характера.

Ретикулоцитоз в анализе, напротив, будет свидетельствовать о том, что у пациента происходит усиленная выработка эритроцитов (в такой ситуации ретикулоциты в крови будут повышены). Повышение уровня ретикулоцитов может свидетельствовать, например, о кровопотере (особенно это важно для внутренних кровопотерь, которые не видны при осмотре).

В норме, ретикулоциты в определенном количестве выявляются и в крови, и в костном мозге. Их число служит прямым отображением качества эритропоэза (образования эритроцитов).

RET способны выполнять ту же функцию, что и эритроцитарные клетки – доставлять кислород к органам и тканям. Однако они не могут полноценно замещать зрелые формы. По сути, активная выработка ретикулоцитов – это ответ костного мозга на дефицит эритроцитарной массы и потребность тканей в кислороде.

При гемолитических анемиях, число ретикулоцитов в крови может превышать 60%, а иногда и полностью замещать зрелые формы, так как все эритроциты разрушаются. При резком усилении эритропоэза, в анализе крови будут обнаруживаться также и нормобласты (клетки, трансформирующиеся в ретикулоциты).

При железодефицитной анемии, во время лечения железосодержащими препаратами, ретикулоциты повышены в норме. Подобный ретикулоцитоз свидетельствует о нормальной регенераторной способности КМ и адекватном лечении, не требующем коррекции. Это связано с тем, что ретикулоциты в крови повышаются раньше эритроцитов (так как являются их предшественниками).

То есть основная функция ретикулоцитов заключается в восполнении дефицита эритроцитарной массы.

Ретикулоциты в анализе крови подсчитываются при:

  • диагностике нарушений гемопоэза;
  • подозрении на гемолиз;
  • малярии;
  • укусах ядовитых пауков и змей;
  • подозрении на скрытое (внутреннее) кровотечение;
  • онкологических новообразованиях;
  • мониторинге продукции эритропоэтина у больных после трансплантации почки;
  • выявлении уменьшенного или увеличенного количества эритроцитов;
  • мониторинге регенераторной способности костного мозга после его пересадки;
  • оценивании реакции пациента на проводимую терапию (лечение препаратами ферума, эритропоэтина, фолиевой кислоты, витамина B12);
  • диагностике качества лечения препаратами эритросупрессоров.

Кровь становится более жидкой, за счет снижения количества клеточных элементов по отношению к увеличенному объему плазмы. Умеренное увеличение количества ретикулоцитов является ответом организма женщины на развившуюся анемию.

Важно помнить, что первый подсчет количества ретикулоцитов должен проводиться до начала приема препаратов, стимулирующих их образование.

Забор крови для подсчета количества ретикулоцитов необходимо проводить утром, на голодный желудок. Допускается употребление воды.

За сутки до исследования рекомендовано ограничить физические нагрузки и исключить эмоциональное перенапряжение. Прием алкоголя желательно исключить за неделю (если анализ проводится планово).

При трактовке результатов необходимо помнить о том, что некоторые медикаменты способны изменять показатель ретикулоцитов.

Ретикулоциты будут уменьшены у пациентов, принимающих:

  • цитостатики;
  • некоторые антибиотики (сульфаниламиды, хлорамфеникол);
  • противоэпилептические препараты (карбамазепин);
  • противопаркинсонические средства;
  • иммунодепрессанты.

У новорожденных малышей ретикулоциты повышены в норме.

До двух дней жизни норма ретикулоцитов составляет от тридцати до семидесяти.

С двух до шести дней – от 10-ти до 30-ти.

С шести до восьми дней – от нуля до десяти.

С восьми дней до пяти недель – от 2-х до 20-ти.

С пяти до семи недель – от 3-х до 35-ти.

С 7-ми до 10-ти недель – от 4-х до 48-ми.

С 10-ти до 12-ти недель – от 3-х до 42-х.

С 12-ти до 15-ти недель – от 3-х до 36-ти.

С пятнадцати недель до года – от двух до 28-ми.

От года до шести лет – от двух до семи;

От шести до 12-ти лет – от двух до 13-ти.

Далее, наблюдаются незначительные половые различия в показателях. Ретикулоциты норма:

  • у мужчин – от 5.1 до 18.1;
  • у женщин – от 5-ти до 20-ти.

Некоторые авторы приводят данные норм ретикулоцитов, которые имеют небольшое отличие от приведенных. Вот для примера еще одна таблица, с которой можно познакомиться.

  • гемолитические анемии (может наблюдаться увеличение количества ретикулоцитов, вплоть до 3000/00;
  • острые кровопотери;
  • токсический гемолиз (укусы ядовитых змей или пауков, прием медикаментов, токсичных для эритроцитов);
  • заболевания крови ( полицитемия , талассемия);
  • малярия;
  • беременность (умеренно компенсаторное увеличение);
  • переезд в высокогорные районы (естественная адаптация);
  • метастазирование отдаленных злокачественных новообразований в костный мозг;
  • тяжелая гипоксия (кислородное голодание органов и тканей);
  • лечение различных анемий препаратами ферума, B12 и фолиевой кислоты;
  • назначение препаратов эритропоэтина.

Также, следует учитывать, что ретикулоцитоз может быть:

  1. истинный (главный маркер регенераторной способности КМ. Отличается увеличением количества ретикулоцитарных клеток как в костном мозге, так и в общем кровотоке;
  2. ложный (сопровождается выбросом ретикулоцитов в периферическую кровь и дальнейшим истощением их запасов в костном мозге). Такая картина характерна для поражения костного мозга.

Уменьшение количества ретикулоцитов происходит при:

  • апластических и гипопластических анемиях;
  • истощении регенераторной способности костного мозга;
  • В12 дефицитной анемии;
  • первичном поражении опухолью непосредственно костного мозга или при его вторичном метастатическом поражении;
  • аутоиммунных заболеваниях, сопровождающихся поражением кроветворной системы;
  • микседеме;
  • заболеваниях почек (снижается выработка эритропоэтина);
  • приеме лекарственных средств, угнетающих костномозговое кроветворение;
  • алкоголизме.
Читайте также:  Шиповник при анемии при беременности

У лиц, злоупотребляющих крепкими спиртными напитками, снижение числа ретикулоцитов происходит по нескольким причинам. Во-первых, происходит угнетение кроветворной функции костного мозга. Во-вторых, подавляется выработка эритропоэтина почками. В-третьих, токсическое воздействие продуктов распада алкоголя способствует разрушению циркулирующих в крови ретикулоцитов, усиливая ретикулоцитопению.

Уровень предшественников эритроцитов имеет высокую ценность в диагностике заболеваний костного мозга, почек, анемий (также он позволяет оценить эффективность назначенного лечения), злокачественных образований и т.д.

источник

Ретикулоциты – это молодые и менее активные эритроциты. Образуются в костном мозге, а потом полностью дозревают в крови. Анализ показывает эффективность кроветворения, по нему можно определить вид анемии: нет ретикулоцитов или мало – угнетение костного мозга, снижены до 0,5 – дефицит железа, фолиевой кислоты и В12, норма (0,5-2%) – кровопотеря, выше 2% — разрушение эритроцитов (гемолиз). При лечении уровень клеток может резко возрастать – ретикулоцитарный криз.

Причинами повышения бывает недостаток кислорода, кровотечение, малярия, полицитемия при раке крови. Низкий уровень ретикулоцитов – это результат применения противоопухолевых и других токсичных медикаментов, облучения, вирусных инфекций, хромосомных болезней.

Ретикулоциты – это предшественники эритроцитов. Появляются в крови при действии эритропоэтина почек на костный мозг. Показывают вид анемии, результаты ее лечения.

А здесь подробнее об общем анализе крови.

Ретикулоцит – это клетка, из которой потом образуется эритроцит. Она имеет аналогичное предназначение – удаление углекислого газа из тканей и доставка кислорода из легких. Эффективность такой работы у молодых и незрелых ретикулоцитов ниже, чем у эритроцитов.

Когда в крови мало кислорода, или почки из-за сужения артерии его недополучают, то начинается выработка гормона – эритропоэтина. Его задача – стимуляция костного мозга. При этом из стволовой (универсальной) клетки через несколько стадий образуется ретикулоцит. Вначале теряется ядро, а потом и внутриклеточные элементы, но появляется гемоглобин. Это означает, что эритроцит приобрел нужную степень зрелости.

Анализ показывает работу костного мозга и селезенки. По уровню ретикулоцитов можно определить вид анемии, причину снижения эритроцитов и гемоглобина. Он помогает оценить результаты лечения при нехватке железа, витамина В12, фолиевой кислоты, болезней почек, опухолей.

Анализ на ретикулоциты назначают при:

  • общей слабости;
  • одышке;
  • бледности кожи;
  • головной боли, головокружении;
  • появлении крови в моче, кале;
  • кровопотере;
  • выявлении анемии неизвестного происхождения или из-за недостатка железа, витаминов, почечной недостаточности;
  • избытке эритроцитов в крови (полицитемия);
  • хроническом воспалении;
  • опухолевом процессе.

Определение ретикулоцитов стоит в среднем от 150 до 350 рублей, около 115 гривен.

В зависимости от возраста и половой принадлежности нормы ретикулоцитов крови отличаются (см. таблицу). Также важно обратить внимание на единицы измерения, они могут быть в процентах (%) и промилле (‰).

Возраст Количество в % Количество в ‰
1-2 день 3-7 30-70
3-6 день 1-3 10-30
7-8 день 0-1 0-10
9 день – 5 недель 0,2-2 2-20
5-7 недель 0,3-3,5 3-35
8-10 недель 0,4-4,8 4-48
11-12 недель 0,3-4,2 3-42
13-15 недель 0,3-3,6 3-36
16 неделя – 1 год 0,2-2,8 2-28
С 1 года у мужчин 0,51-1,81 5,1-18,1
С 1 года у женщин 0,5-1,7 5-17

Для взрослых характерна стабильность уровня ретикулоцитов, тогда как для новорожденных и детей до года их содержание в крови постоянно меняется. Это связано с постепенным развитием кроветворных органов – селезенки и костного мозга. Кровь для исследования чаще берут из вены, а современным методом определения является не окрашивание, как ранее, а цитометрия.

В результатах анализа крови ретикулоциты обозначаются латинскими буквами RET. При этом всегда указывается общее число эритроцитов – RBC, что в переводе означает красные кровяные тельца. Процентное содержание или промилле незрелых ретикулоцитов будет второй цифрой. Такой тест не входит в общее клиническое исследование крови, на него необходимо отдельное направление.

На ретикулоциты крови забор материала может быть из среднего или безымянного пальца – капиллярная, но в большинстве крупных лабораторий принято брать из вены. Это объясняется более точными результатами диагностики во втором случае.

Для достоверности итогов обследования при подготовке учитывают:

  • прием медикаментов – необходимо согласовать отмену тех препаратов, которые могут повлиять на результат, для этого за 3-5 дней важно уточнить применение таблеток и инъекций у врача;
  • употребление пищи – минимальный перерыв составляет 4 часа, оптимальный – 8-10;
  • время суток – сдавать кровь нужно утром, до 11 часов;
  • физические нагрузки – не рекомендуются за сутки;
  • стрессовые влияния (переживания, волнения) – исключают за день, особенно важно их устранить за 3 часа до взятия крови;
  • курение – запрещается за час до процедуры.

Для подсчета ретикулоцитов кровь смешивают с веществом, которое предотвращает свертывание, и направляют подписанную пробирку в лабораторию. Ранее использовалась методика окраски по Романовскому, или с метиленовым синим.

Незрелые эритроциты отличаются от полноценных наличием остаточных клеточных элементов – митохондрий, нитей ДНК, частей ядра. Это может выглядеть, как сеточка, в переводе на латынь – ретикулум, что и дало название этим клеткам. Возможны также включения, похожие на песок или зерна, глыбы, клубок, венчик.

В настоящее время для анализа крови применяется автоматический подсчет, он называется метод проточной цитометрии. Клеточные элементы перемещаются в узком капилляре (пробирка с очень маленьким просветом), а их в это время просвечивают лучами лазера. Гематологический анализатор сам определяет процент ретикулоцитов.

Образование ретикулоцитов

При анемии важно знать уровень ретикулоцитов, так как от этого зависит, есть ли в костном мозге резерв для пополнения недостатка эритроцитов. Если их мало, то это означает, что можно не рассчитывать, что организм самостоятельно восстановит состав крови, и необходимо вводить клетки извне (эритроцитарная масса), стимулировать образование эритропоэтином.

В зависимости от функции костного мозга все анемии делят на:

  • арегенераторные – кроветворение угнетено из-за врожденной апластической анемии или под действием ядовитых веществ, противоопухолевых средств, облучения, вируса, опухоли, ретикулоциты отсутствуют полностью;
  • гипорегенераторные – возникают из-за выраженного дефицита витаминов, железа, (фолиеводефицитная, железодефицитная, в12-дефицитная), ретикулоциты до 0,5%;
  • норморегенераторные – ретикулоциты в норме 0,5-2%, а недостаток эритроцитов вызван потерей крови (геморрагическая анемия);
  • гиперрегенераторные — содержание ретикулоцитов превышает 2%, чаще появляется при разрушении клеток (гемолитическая анемия).

Ретикулоцитарный криз – это резкое возрастание количества ретикулоцитов. Они могут повыситься до 200-300%. Чаще всего такое явление происходит в первую неделю лечения анемий, связанных с дефицитом витамина В12, железа или фолиевой кислоты. Выявление преобладания молодых форм над зрелыми будет косвенными подтверждением диагноза.

Очень важно при непонятной причине резкого возрастания ретикулоцитов исследовать не только кровь, но и взять пункцию костного мозга.

Ретикулоцитарный индекс – это произведение процентного содержания ретикулоцитов на показатель гематокрита. Последний вычисляется как объем эритроцитов в единице объема крови. Норма его равна 45-48%.

Если гематокрит, а соответственно, и число эритроцитов, падает, то ретикулоцитов будет больше, но это повышение ложное. Такая закономерность объясняется относительно стабильным числом молодых клеток в крови. Поэтому ретикулоцитарный индекс покажет истинную картину кроветворения.

При расшифровке результатов необходимо учитывать, что ретикулоциты очень недолго циркулируют в кровеносном русле. Их период жизни примерно равен 2 дням, тогда как зрелые формы живут около 3 месяцев. Поэтому индекс продукции костного мозга покажет только недавнюю его активность.

При железодефицитной анемии важно понимать, доступно ли железо крови для костного мозга, как оно используется при кроветворении. Так как бывает ситуация, когда даже при достаточных запасах микроэлемента (в виде ферритина) он не включается в состав гемоглобина.

Для ранней диагностики нехватки железа этот тест более информативен, чем насыщение зрелых эритроцитов. Норма показателя – 28-35 пг. При снижении делают вывод о недоступности минерала, а если содержание гемоглобина в ретикулоцитах повышено, то это либо хороший результат лечения, либо причину анемии нужно искать не в недостатке железа.

Индекс, или фракция незрелых ретикулоцитов, определяется процентом юных клеток ко всему количеству. Эти молодые формы крупнее обычных и содержат больше нуклеиновых кислот. При активизации костномозгового кроветворения число незрелых ретикулоцитов возрастает, а при подавлении – снижается. Такая углубленная диагностика нужна при:

  • пересадке костного мозга, почки;
  • лечении противоопухолевыми препаратами;
  • введении эритропоэтина или витаминов, железа;
  • выявлении скрытой потери крови или оценки остановки внутреннего кровотечения;
  • исследовании степени активности аутоиммунного процесса (образование антител к своим клеткам) с разрушением эритроцитов.

К причинам повышения ретикулоцитов относится кислородное голодание, оно возникает при:

  • проживании в горной местности;
  • работе под водой;
  • длительном нахождении в помещении с недостаточной вентиляцией;
  • курении;
  • алкоголизме.

Отмечается рост содержания клеток при беременности, если при этом нет анемии, то такое увеличение считается нормальным. Вызвать ретикулоцитоз (высокие показатели) может анемия из-за:

Причина Последствия
Кровотечение Костный мозг восстанавливает нормальный уровень утраченных клеток, при этом важно, что острая кровопотеря компенсируется на 3-4 день, а при постоянной (хронической) ретикулоциты все время повышены.
Разрушение эритроцитов (гемолиз) Приводит к росту показателя до 300%, связано с врожденными болезнями, иммунным воспалением и повреждением мембраны, заражении малярией.

Вне зависимости от причины анемия характеризуется:

  • общей слабостью;
  • быстрой утомляемостью;
  • головокружением;
  • бледностью кожи и слизистой глаз;
  • одышкой и учащенным сердцебиением при небольшой нагрузке.

Полицитемия – это еще один провоцирующий фактор ретикулоцитоза. Она представляет собой неконтролируемое образование клеток в костном мозге при хроническом лейкозе (раке крови). Проявления:

  • тяжесть в голове;
  • шум в ушах;
  • тромбоз вен ног (отечность, посинение кожи, боль при движении);
  • закупорка артерий – инфаркт (приступ загрудинной боли, нарушения ритма), инсульт (слабость в конечностях, невнятная речь, асимметрия лица);
  • зябкость стоп;
  • бессонница;
  • ухудшение зрения;
  • покраснение лица, шеи, кистей рук.

Повышение ретикулоцитов бывает и при хронических длительных воспалениях, опухоли костного мозга или распространения в него метастазов. Рост показателей на фоне лечения рассматриваются как критерий успеха.

Понижение ретикулоцитов бывает из-за торможения образования в костном мозге при таких состояниях:

  • недостаточное поступление железа, витамина В12 и фолиевой кислоты при однообразном питании или нарушении усвоения в кишечнике;
  • угнетение кроветворения алкоголем;
  • снижение уровня гормонов щитовидной железы;
  • хронические вялотекущие инфекции;
  • аутоиммунное воспаление (ревматоидный артрит, системная красная волчанка, периартериит); Ретикулоциты понижаются при системной красной волчанке
  • заболевания почек;
  • сахарный диабет с нефропатией;
  • отравление ядовитыми веществами;
  • облучение.

Клинические проявления сходны с анемиями (слабость, бледности кожи, постоянная усталость), к ним могут добавиться и специфическими симптомы воспаления или интоксикации (головная боль, тошнота, повышение температуры, боли в мышцах и суставах). Лечение полностью зависит от причины торможения функций костного мозга.

Если ретикулоцитов очень мало или нет в крови, то это признак апластической анемии. Ее вызывают:

  • хромосомные болезни;
  • длительное лечение высокими дозами опухолей, эпилепсии, инфекций, малярии, тиреотоксикоза;
  • контакт с мышьяком, пестицидами, рентгеновским или ионизирующим облучением;
  • вирусный гепатит, мононуклеоз, цитомегаловирусная инфекция, грипп;
  • туберкулез;
  • опухоли.

Апластическая анемия проявляется резкой слабостью, головокружением, склонностью к предобморочным состояниям, потере сознания. Если одновременно поражены и остальные клеточные ростки (тромбоциты и лейкоциты), то присоединяются кровотечения, частые инфекционные болезни, потеря веса.

Наиболее тяжелое осложнение – кровоизлияние в мозговые ткани. Для лечения ретикулоцитопении (низкие показатели) назначают иммуноглобулин, гормоны, переливание крови и ее компонентов. При неэффективности проводят пересадку костного мозга, стволовых клеток, удаляют селезенку, в которой разрушаются эритроциты.

А здесь подробнее о биохимическом анализе крови.

Ретикулоциты – это предшественники эритроцитов. По анализу можно определить причину недостатка гемоглобина, работу костного мозга. Исследование помогает на ранней стадии выявить дефицит железа, скрытое кровотечение, разрушение красных клеток крови. По динамике изменения показателей оценивают результат лечения анемии.

Смотрите на видео о расшифровке анализа крови:

Разрушение оболочки эритроцитов называют гемолиз крови. Зачастую его причины появления в биохимическом анализе кроются в беременности с резус-конфликтом. Но признаки проблемы могут быть даже у мужчин. Пробы берутся с соблюдением стерильности, чтобы точно определить — норма или острый период в организме. Чем опасен гемолиз?

источник