Меню Рубрики

Набор для диагностики инфекционной анемии лошадей

I.ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

1. Международное непатентованное наименование – Набор для диагностики инфекционной анемии лошадей в реакции диффузионной преципитации (РДП).

2. В состав набора входят следующие компоненты:

— Антиген вируса ИНАН специфический преципитирующий (антиген) – Антиген представляет собой стерильный, лиофилизированный экстракт гомогената селезенки лошади, больной инфекционной анемией. Антиген имеет вид сухой однородной по цвету и структуре аморфной массы темно- или светло-коричневого цвета – 1 флакон (2 см3);

— Сыворотка специфическая преципитирующая (антисыворотка) – Инактивированная лиофилизированная сыворотка лошади с хроническим течением инфекционной анемии. По внешнему виду пористая масса светло-бежевого цвета с желтоватым оттенком – 3 флакона (2 см3);

— Кислота борная – Сыпучий порошок белого цвета – 1 флакон (1,65 г);

— Раствор натрия гидроокиси 3%-ный – Бесцветная прозрачная жидкость – 1 флакон (10 см3);

— Агар «Дифко» – Сыпучий порошок светло-бежевого цвета – 1 флакон (1,5 г);

3. Компоненты, входящие в состав набора (антиген, антисыворотка, кислота борная, рас­твор натрия гидроокиси, агар «Дифко»), расфасованы во флаконы вместимостью 10 см 3 , герме­тично укупоренные резиновыми пробками, укрепленными алюминиевыми колпачками. Компо­ненты, представленные в лиофилизированном виде (антиген, антисыворотка), после добавле­ния дистиллированной воды растворяется в течение 3-5 минут.

4. Флаконы с компонентами, входящими в состав диагностического набора, уложены в коробки пенополистирольные с гнёздами или картонные коробки с разделительными перего­родками, обеспечивающими их целостность. В каждую коробку вкладывают инструкцию но применению диагностического набора.

5. Срок годности набора — 24 месяца с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования. По истечении срока годности набор к применению не пригоден.

Антиген и антисыворотку, неиспользованные в день растворения, сохраняют в заморо­женном состоянии при температуре минус 10 °С до повторного исследования. Повторное замо­раживание сыворотки не допускается.

6. Диагностический набор транспортируют и хранят в сухом темном месте при температуре от 2 °С до 8 °С.

Допускается транспортирование набора при температуре до 20 °С не более 5 суток.

7. Диагностический набор следует хранить в местах, недоступных для детей.

8. Флаконы с компонентами набора без маркировки, с нарушением целостности и/или герметичности укупорки, с измененным цветом и/или консистенцией, с наличием посторонних примесей, с истекшим сроком годности, бракуют, обеззараживают путем кипячения в течение 30 минут и утилизируют.

Утилизация обеззараженных компонентов диагностического набора не требует соблю­дения специальных мер предосторожности.

II. ПРИНЦИП МЕТОДА

9. Антиген (экстракт гомогената селезёнки) содержит внутренний структурный белок вируса с молекулярной массой g 26. Он относится к так называемым растворимым антигенам, способным диффундировать в агаровом геле. Является общим (группоспецифическим антиге­ном) для всех штаммов вируса инфекционной анемии лошадей (ИНАН).

10. Принцип метода основан на встречной диффузии антител (иммунной сыворотки) и растворимого антигена в агаровом геле. При наличии в исследуемой сыворотке антител гомо­логичных антигену образуется полоса преципитации.

11. Набор применяют для лабораторной диагностики инфекционной анемии лошадей с целью обнаружения специфических антител в сыворотках крови лошадей больных инфекцион­ной анемией.

12. Специфические антитела появляются в крови животных через 2-6 недель после ин­фицирования и сохраняются на протяжении длительного времени (более 7 лет).

III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ

13. Диагностический набор применяют для исследования сывороток крови лошадей на выявление антител к вирусу инфекционной анемии при остром, хроническом и латентном те­чении болезни. Набор рассчитан на исследование 90-120 проб сывороток крови.

14. Антиген и антисыворотка, имеющиеся в наборе, используются в качестве тест-системы «антиген-антитело» при постановке реакции.

15. Перед постановкой реакции сухие антиген и антисыворотку растворяют дистиллированной водой в объёме, указанном на этикетке (приготовленные разведения являются рабочими разведениями). Антиген и антисыворотка должны полностью раствориться в течение 3- 5 минут без образования не разбивающихся при встряхивании хлопьев.

16. Испытуемые сыворотки получают от исследуемых лошадей в количестве не менее 5-6 см 3 . Их консервируют путём добавления антибиотиков — пенициллина и стрептомицина по 1000 ЕД/мл и хранят при температуре от 4 до 8 °С в течение 10 суток. Сыворотки без кон­серванта сохраняют в замороженном состоянии.

17. Для приготовления 1% геля агара «Дифко» в стеклянную колбу вместимостью 250- 300 см 3 отмеряют 140 см 3 воды дистиллированной и, затем, в неё последовательно вносят кислоту борную и раствор натрия гидроокиси 3%. Содержимое колбы перемешивают до пол­ного растворения борной кислоты. Проверяют pH буфера. Буфер должен иметь pH в пределах 8,6±0,1.

В приготовленный боратный буфер вносят агар «Дифко» — 1.5 г. Колбу ставят в баню с водой, воду доводят до кипения и выдерживают в бане до полного рас плавления агара. В чашки Петри диаметром 15 см вносят 15 см 3 расплавленного агара, предварительно охладив его до 60 °С. Чашки оставляют на один час с приоткрытыми крышками и дают ему застыть.

18. Контроль качества агара проводят визуально, после его застывания. Слой агара дол­жен быть ровным по всей поверхности чашки, без пузырьков газа. Толщина слоя 3 мм.

После застывания агара приступают к вырезанию лунок. Для этого используют специ­ально изготовленные пробойники из семи жестко закрепленных трубочек диаметром: 7 мм — одна в центре и шесть по окружности на расстоянии 3 мм от центральной и друг от друга.

Агаровые пробки удаляют иглой, пинцетом или канюлей, соединённой с вакуумной установкой. Если в лунках накапливается влага, то её перед внесением реагентов отсасывают пипеткой.

Используют две схемы заполнения лунок. Первая — в центральную лунку вносят микропипеткой 0,05-0,06 см 3 антигена в три периферические лунки, через одну, закапывают по 0,05-0,06 см 3 антисыворотку в рабочих разведениях. Оставшиеся три свободные лунки запол­няют с помощью тонко оттянутой пастеровской пипетки исследуемыми сыворотками. При этом: в одной чашке исследуются 12 проб сыворотки.

20. В случае проведения массовых исследований может быть использована вторая схема заполнения лунок, которая позволяет в одной чашке одновременно исследовать 16 проб. В центральную лунку вносят антиген, в две периферические, диаметрально противоположные лунки вносят антисыворотку и оставшиеся четыре лунки — испытуемые сыворотки.

Для каждой пробы сыворотки используют отдельную пастеровскую пипетку. По­сле заполнения лунок чашки Петри закрывают крышками и помещают во влажную камеру при температуре от 18 до 25 °С.

Реакцию учитывают через 48-72 часа. Чашки просматривают на тёмном фоне в косо направленном пучке света. Для этой цели используют осветитель ОИ-19 или другой анало­гичный прибор.

Оценку реакции делают по контрольной линии преципитации — линии преципитации между контрольными антигеном и антисывороткой. Если она отсутствует или слабо выра­жена, то исследование необходимо повторить. Контрольные линии преципитации должны быть чёткими, располагаться посредине между лунками с антигеном и сывороткой.

22. Существенный сдвиг контрольных линий преципитации в сторону антигена или сы­воротки, а также если она слабо выражена, является показателем слабой активности одного или обоих компонентов набора. В этом случае проводят подтитровку антигена и сыворотки. Для этого сухой препарат антиген или антисыворотку разводят в два раза меньшем объёме дистиллированной воды, затем готовят разведения 1:1,25; 1:1,5; 1:1,75 и проверяют в РДП. За рабочее разведение принимают то разведение компонентов диагностикума, которое даёт чёт­кие линии преципитации, расположенные посредине между лунками с антигеном и антисывороткой.

23. Оценка результатов реакции:

Отрицательная — контрольные линии продолжаются в сторону лунки с испытуемой сы­вороткой без изгибов или с небольшим изгибом в сторону контрольной сыворотки.

— между лунками с испытуемой сывороткой и антигеном образуется полоса преципита­ции, которая соединяется с контрольной линией;

— линия преципитации отсутствует, но контрольные линии образуют вблизи с испыту­емой сывороткой изгиб, направленный в сторону антигена — слабоположительная сыворотка;

— контрольные линии укорачиваются со стороны лунки с испытуемой сывороткой, в отдельных случаях контрольные линии полностью растворяются, что свидетельствует о вы­соком титре антител. Более различимые линии преципи­тации будут образовываться, если эти пробы развести 1:4 или 1:8 и повторить реакцию.

Сомнительная — слабый изгиб контрольной линии плохо просматривается, образуются интенсивные неспецифические линии или ореол вокруг лунок, что затрудняет учёт реакции.

От животных, давших сомнительную реакцию, через 2-3 недели берут кровь и исследование повторяют.

Пробы сыворотки, давшие при повторном исследовании отрицательный результат, счи­тают отрицательными.

При получении повторной сомнительной реакции — результат считают положитель­ным.

Неспецифическая преципитация — образуется с некоторыми пробами сыворотки, особенно полученными от старых лошадей. Признаком неспецифической реакции является пере­крещивание линий преципитации с контрольными линиями.

В одной и той же пробе сыворотки могут быть специфические и неспецифические ан­титела.

24. При образовании интенсивного ореола вокруг лунок, затрудняющего учёт реакции, эти пробы сыворотки исследуют повторно, добавив к агару 5% хлористого натрия. Для этого к 150 мл боратного буфера добавляют 7,5 граммов химически чистого хлористого натрия.

25. Жеребят, полученных от положительно реагирующих в РДП кобыл, исследуют по­сле отъёма в возрасте 6-8 месяцев.

26. Результаты учёта реакции регистрируют в специальных журналах, которые должны быть прошнурованы, пронумерованы и скреплены печатью.

IV. МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

27. При работе с набором следует соблюдать общие правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственным и средствами ветеринарного назначения,

28. Все лица, участвующие в проведении серологических исследований на инфекцион­ную анемию лошадей, должны быть одеты в спецодежду (халат, головной убор, резиновые пер­чатки). В местах работы должна быть аптечка первой доврачебной помощи,

29. При попадании компонентов диагностическою набора на кожу и/или слизистые обо­лочки их следует промыть большим количеством чистой водопроводной воды.

источник

Контагиоз.болезнь, однокопыт., х-ся пораж.кроветвор. орг., прогрес.анемией, слабостью, рецедив. лих., хрон.теч.

1. Относится к неклассифицированным вирусам.

2. РНК-содерж. вирус, округлой формы. Вирус интенсивно размнож. в к.мозге и крови, вызывая угнетение эритропоэза и гемолиз части эритроцитов во время приступа лихорадки. Обладает гемагглютинир. св-ом. Устойчив к высушиванию и гниению.

3. Болеют лошади всех возрастов и пород, а также ослы и мулы. Передается –кровосо. насекомыми, с молозивом или в/утробно, случка, через пищевод, контакт с поврежд.кожей. Болеют чаще в пастб.период (жаркое t).

Различают сверхострое (септицемическое), острое, подострое и хроническое (латентное) течение.

Признаки – рецидив. лих., расстройство серд.деятельности, слабость, признаки анемии во время лихорадки, исхудание. Нередко колики, кровавый понос , слиз. оболочки -желт.

Пат.изм. дистрофич. измен. паренхим. органов и признаки геморрагич. диатеза. Лимф. узлы увеличены, гиперемир., селезенка увеличена, наполнена кровью, печень увеличена, кровь водянистая, светло-красного цвета. При хрон. теч. картина более сглажена.

4. Диагноз ставят комплексно: учитывают эпизоотологич. данные, клиническую картину, данные гематологич. и лаб. исслед., пат.ан.и гистологические изменения.

Пат.мат: — кусочки печени, селезенки, сердца, лимфоузлов; биопроба: групповая на жеребятах, КК. (ЦПД – лош. эритр.)

Сер. р-ии.: РДП, РСК. РЗГА, РИФ; ИФА.

5. Иммунитет при ИНАН изучен недостаточно. У хронически больных — нестерильный иммунитет. За рубежом – инактивир. и жив. вакцины; диагност. наборы для РДП.

Остро прот. Болезнь однокопыт. и людей, вызываемая нейротроп.вир.из группы togaviiridae, передающихся трансмиссивным путем. Сопровожд. поражением ЦНС, ЖКТ, печени, лихорадкой.

Передача: укусы клещей, комаров, москитов, мошек, слепней.

Клин.призн.: Сезонность, наруш.координации движ., резкое угнетение или возбужд., стремление вперед, движ.по кругу, скрежет зубами, «безумный взгляд», пена на коже. Желт. слиз., прекращ. перестальтики, запоры, обезвоживание, дисфагия, слепота. Сгущение крови, гиперлейкоцитоз, билирубинэмия.

Диагностика: РГА, РГАд, МФА мазки-отпеч. (обнаружение), РЗГА, РН, РСК, МФА, тИФА, ПЦР(идентификация);

биопроба – новорожд. (мышы, хомяки, мор.свин), кур. эмбрионы (желток).

Проф. Бивалентная инактивир.вак.(вост. и запад.), вирусвак. из аттенуированного штамма ТС-83(венусуэльский), формул.вак.из мозга мышей, вир.вак.из аттенуированного в культ. мыш. фибробластов (японский)

65 Ха-ка вир. злокачественной катаральной горячки крс. Лаб. диагностика и средства для специфич. проф.

— Неконтагиозная болезнь крс, Сопровождающаяся лихорадкой, крупозным воспалением слиз. обол., пораж.глаз и нерв.сист. Часто смерт., распр.повсемесно.

Вирус. Из сем. Herpesviridae. Днка-сод, 2нит, Полиморф ли сферич., есть капсид, суперкапсид, иногда доп.обол.с отрост. На поверх.гликопротеиды. Не стабилен при замораж., чувствит.к эфиру, хлороформу, в естествен.условиях 35днй.

Заражение спорадически, болеют чаще молодые(1-4г).

Течение: 1) острее и сверхострое – общее пораж., кишеч. ф-ма, респират. ф-ма. Резкое повыш.t до 42С, мыш.тремор, обильный пот, t не «сбиваеться», слезы, светобоязнь, резкое угнетение или возбужд.,до агрес. Смерть.

2)Подострое теч. – воспол.лоб.и нос.пазух, заполн.фибрин.массой, могут раздуваться. На слиз.обол.-налеты из зловон., дифтирит.серх пленок, эрозии, обильные серозно-гной.течение. Пораж.роговицы глаз – слепота, пузырьки, язвочки, в плоть до выпадения хрусталика и стекловид.тела. Бледность рогов, спадение рогового чехла, зловон.понос с кровью, редко аборты.

Лаб.диагностика: проводиться редко, РСК с сыв.крови, ПЦР в пат.мат.

Проф. и лечение: нет. Больных изолируют и лечат симптоматически.

73. Хар-ка вир Алеутской болезни норок (плазмоцитоз) и лаб. диагностика.

— контагиозная, медренно развивающаяся, инфек., Хаар-ся систем.пролифер.лимфойд.кл.

2. Возбуд. изучен слабо. ДНК-сод., капсид без оболочки, устойчив к хим. вещ-вам и высокой t. А.г. струк. и гемагглют. Св-ва не изучены.

3. Восприим. норки, независимо от возраста, пола и цветных вариантов. Вирус бессимптомно может персистировать в орг-ме пушных и диких жив. Встречается везде, где есть норки. В организме, вызывает интенсив.пролиф. лимфоид. кл. в лимф. узлах, печени, селезенке, почках и др. паренхим. органах, вследствие чего развивается гипергаммаглобулинемия.

Клин. призн.: Появл. не за долго до гибели, сопровожд.истощ., изъязв. слиз.обол. рта. губ, десен и прогрессир. анемией. У щенят симптомы редко, чаще они погибают при бессимптом. теч.болезни.

Патан. измен.: У павших – множ. мелкие изъязв.я и кровоизлияния в рот. полости, паренхим.органы увеличены. Можно исслед. мазки-отпечатки из лимфоузлов для обнаруж.в них плазмоцит.ре-ии.

Пат.мат.: кровь, кусочки паренхиматозных органов.

Лаб. диагност.: йодноагглютинационный тест (йодная проба). Он основан на свойстве раствора йода осаждать гамма-глобулины при повышении их концентрации в сыворотке крови. Также тимоловая проба, глютаральдегидный тест, РИЭОФ, ИФА и радиоиммун.метод.

5. Иммунитет у перебол. — не формир. Все заболевшие норки гибнут. В 1964 г. –патент на инактивир. формолвакцина, действие которой позволяет прервать распространение инфекции.

3.Определение болезни хар. воспалением слизистых обол. и появлением студенистых отёков ушей головы конечностей и т.д. имеет 2-е формы 1) классическая, 2)надулярная. Классическая 100% смерть.

4.Восприимчивые ж-е кролики зайцы

5.Источники заражения контакт больных со здоровыми, комары клещи, блохи, вши

6.Пути передачи инфекции трансмиссивно, через кожные повреждения и слиз. обол.

7.Патогенез заболевания Развиваются (в нач. стад.) маленькие бугорки, переростающ. в студенистые отёки ушей, конечностей головы, отказ от еды.

8.Клин. признаки болезни повышение t тела, студенистые отёки, отказ от еды, гиподинамия, тахекардия, учащение дыхания.

источник

Способ изготовления культурального антигена из вируса инфекционной анемии лошадей и набор для индикации антител или антигена вируса инфекционной анемии лошадей

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии. Для изготовления антигена используют новый штамм вируса инфекционной анемии лошадей (ИНАН) «3-К-ВНИИТИБП-ВИЭВ». Штамм выращивают в культуре клеток кожи и/или мышц, и/или легкого, и/или почек эмбриона лошади до накопления вируса в титре 10 5 ИД 50/мл. Концентрируют ультрафильтрацией в 10-20 раз. Отделяют липидную оболочку обработкой эфиром на холоду. Получают целевой продукт, представляющий собой пептид с м.м. 24-26 кД, несущий группоспецифические антигенные детерминанты. После стадии концентрирования вирусный материал может быть дополнительно подвергнут очистке скоростным центрифугированием и ультрацентрифугированием. После отделения липидной оболочки полученный антиген повторно очищают аффинной хроматографией. В этом случае целевой продукт представляет собой иммуноэлектрофоретически чистый пептид. Полученный культуральный антиген используют для составления наборов для индикации антител или антигена вируса ИНАН. Наборы для индикации антител предназначены для диагностики инфекционной анемии лошадей в РДП или ИФА. Набор для индикации антигена предназначен для титрования антигена вируса ИНАН в процессе культивирования. Набор для индикации антител в РДП содержит культуральный антиген и специфическую преципитирующую сыворотку. Набор для индикации антител в ИФА содержит культуральный антиген для иммобилизации на твердом носителе, полистироловый планшет и конъюгированный с пероксидазой хрена антивидовой иммуноглобулин класса G(IgG). Набор для индикации антигена содержит культуральный антиген для иммобилизации на твердом носителе, полистироловый планшет и конъюгированный с пероксидазой хрена IgG к вирусу ИНАН. Наборы для ИФА также содержат желатин, субстрат для проведения пероксидазной реакции, детергент и буферные растворы. Наборы могут также содержать положительный и отрицательный контроли. Изобретение повышает чувствительность, стандартность и специфичность культурального антигена и наборов для индикации антител и антигена. 2 с. и 16 з.п.ф-лы.

Читайте также:  Что лучше при анемии уколы или таблетки

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии, а именно к получению антигена и тест-систем для обнаружения антител к вирусу инфекционной анемии (ИНАН) лошадей, а также индикации и титрования вируса.

Известен способ получения антигена вируса ИНАН лошадей путем культивирования вируса на культуре эмбриона клеток почки лошадей. Культуру клеток инкубируют при 37 o C в течение 2 недель. Поддерживающая среда — среда Игла с добавлением 3%-ной телячьей сыворотки, антибиотиков и бикарбоната натрия. Околоклеточную культуральную жидкость сливают и исследуют на наличие вирусного материала (Orrego A. Et al. Virilence and in vitro growth of cell-adapteol strain of equine infections anemia virus afters serial passage in ponies // «Amer. J. Vet. Res.», 1982, v. 43, N 9, p. 1556-1560).

Однако известный способ нетехнологичен, дает невысокий выход вируссодержащего материала и используется только в лабораторных условиях, а получаемый антиген характеризуется низкой специфичностью и активностью.

Наиболее близким аналогом является способ получения антигена вируса ИНАН лошадей путем внутривенного введения 8-10 жеребятам освеженного штамма вируса ИНАН. На высоте температурной реакции жеребят убивают и извлекают селезенку. Антиген представляет собой экстракт из гомогенизированной селезенки. Известный набор для серодиагностики инфекционной анемии в реакции диффузной преципитации (РДП) содержит антиген вируса ИНАН, специфическую сыворотку, полученную гипериммунизацией лошадей специфическим вирусом, и отрицательную сыворотку («Ветеринарные препараты». — Справочник под ред. Д.Ф.Осидзе, М., Колос, 1981, с.97-98).

Недостатком известного способа является то, что для изготовления антигена необходимо проводить вынужденный забой экспериментально зараженных лошадей, а получаемый антиген не стандартен и не обладает достаточно высокой чувствительностью Задачей изобретения является разработка промышленной технологии получения антигена ИНАН, позволяющей нарабатывать большое количество вирусного материала в культуре клеток, исключающей вынужденный забой лошадей, и получении на его основе стандартных наборов для индикации антител и антигена.

Технический результат заключается в повышении чувствительности, стандартности и специфичности культурального антигена и наборов для индикации антител и антигена.

Сущность изобретения заключается в следующем. При изготовлении культурального антигена для индикации антител и антигена вируса инфекционной анемии лошадей используют штамм вируса инфекционной анемии лошадей N «3-К-ВНИИТИБП-ВИЭВ». Штамм выращивают в культуре клеток кожи и/или мышц, и/или легкого, и/или почек эмбриона лошади до накопления вируса в титре 10 5 ИД, 50/мл, концентрируют ультрафильтрацией в 10-20 раз, отделяют липидную оболочку обработкой эфиром на холоду и получают целевой продукт, представляющий собой пептид с молекулярной массой (м.м.) 24-26 кД, несущий группоспецифические антигенные детерминанты.

После стадии концентрирования вирусный материал может быть дополнительно подвергнут очистке последовательно методами скоростного центрифугирования и ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы. Далее отделяют липидную оболочку обработкой эфиром на холоду, очищают аффинной хроматографией и получают целевой продукт, представляющий собой иммуноэлектрофоретически чистый пептид с м.м. 24-26 кД, несущий группоспецифические антигенные детерминанты.

Для изготовления культурального антигена используют новый культуральный штамм вируса инфекционной анемии лошадей «3-К-ВНИИТИБП-ВИЭВ». Штамм выделен от больной ИНАН лошади и адаптирован к культуре клеток эмбриона лошади.

Штамм депонирован в коллекции вирусов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ), хранится в коллекции Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности (ВНИИТИБП) и имеет регистрационный номер «3-К-ВНИИТИБП-ВИЭВ».

Штамм вируса инфекционной анемии лошадей характеризуется следующими свойствами.

Морфология. РНК-содержащий вирус. Форма вирионов овальная, ассиметрическая, имеет липидную внешнюю оболочку, размер вирусных частиц 80-200 нм.

Характер образования по Дульбекке: бляшки не образует.

Чувствителен к эфиру, устойчив к температуре 50 o C в течение 30 мин; внутриядерные и внутриплазматические базофильные и эозинофильные включения не вызывает.

Преобладающий тропизм. Эпителиотропный.

Восприимчивые животные. Естественно восприимчивы лошади, ослы, мулы, зараженные подкожно, внутримышечно, внутривенно; инкубационный период от 4-7 дней до 90 дней.

Культуральные свойства. Штамм размножается в культуре клеток почки, кожи, мышц и легкого эмбриона лошади.

Серологическая характеристика штамма. Активен в реакциях гемагглютинации (РГА), диффузной преципитации (РДП), иммуноферментном анализе (ИФА). Титр вируса в РГА с эритроцитами лошади и морской свинки — 1:8-1:16, в РДП (после обработки эфиром) — 1:1 — 1:4, в ИФА (после обработки эфиром) — 1:32-1:128.

Иммуногенная активность. Не иммуногенен.

Наличие титра инфекционности: 1 10 5 ИД 50/мл для культуры клеток почки, кожи, мышц и легкого эмбриона лошади.

Эпизоотичность штамма. В естественных условиях может распространяться.

Стабильность. Штамм стабилен, при длительном хранении при -40 o C титр вируса не изменяется в течение 2 лет, антигенная активность сохраняется не менее 2 лет.

Штамм поддерживается путем заражения переживаемой культуры клеток почки эмбриона лошади один раз в 2 года.

Полученный культуральный антиген используют для составления наборов для индикации антител к вирусу ИНАН или антигена вируса ИНАН.

Наборы для индикации антител к вирусу инфекционной анемии лошадей предназначены для диагностики инфекционной анемии лошадей в РДП или ИФА.

Набор для индикации антигена предназначен для титрования антигена вируса ИНАН в ИФА в процессе культивирования, например, методом модифицированного конкурентного ИФА.

Набор для индикации антител к вирусу инфекционной анемии лошадей в РДП содержит культуральный антиген вируса ИНАН и специфическую преципитирующую сыворотку, полученную от экспериментально зараженных вирусом ИНАН лошадей.

Набор для индикации антител к вирусу инфекционной анемии лошадей в ИФА (непрямом ИФА) содержит культуральный антиген вируса ИНАН для иммобилизации на твердом носителе, полистироловый 96-ти луночный планшет и конъюгированный с пероксидазой хрена антивидовой иммуноглобулин класса G (lg G).

Набор для индикации антигена в ИФА содержит культуральный антиген вируса ИНАН для иммобилизации на твердом носителе, полистироловый 96-ти луночный планшет и конъюгированный с пероксидазой хрена lg G к вирусу ИНАН.

При комплектации наборов для индикации антител или антигена в ИФА предпочтительно используют дополнительно очищенный согласно изобретения иммуноэлектрофоретически чистый препарат культурального антигена вируса ИНАН.

Наборы для индикации антител или антигена в ИФА также содержат желатин, субстрат для проведения пероксидазной реакции, например, ортофенилендиамин и перекись водорода. Кроме того, в наборы включены детергент — тритон Х-100 или твин-80 и буферные растворы — фосфатно-солевой, натрий бикарбонатный и цитратный. Наборы могут также содержать положительный и отрицательный контроли.

В наборе для индикации антигена в ИФА в качестве положительного контроля используют иммуноэлектрофоретически чистый препарат антигена культурального вируса ИНАН с известной положительной преципитирующей активностью, определенной в РДП с референс-сывороткой. Отрицательный контроль — образцы среды культивирования неинфицированных вирусом клеток эмбриона лошади. Отрицательный контроль подвергают очистке, как и специфический антиген.

В наборе для индикации антител в ИФА в качестве положительного контроля используют специфическую сыворотку от экспериментально зараженной вирусом ИНАН лошади с известным титром; в качестве отрицательного контроля — сыворотку крови клинически здоровой лошади.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Для изготовления антигена культурального для индикации антител к вирусу ИНАН или антигена вируса ИНАН используют культуральный штамм N «3-К- ВНИИТИБП-ВИЭВ» вируса ИНАН лошадей, адаптированный к культурам клеток кожи, мышц, легкого и почек эмбриона лошади.

Вирусным материалом является среда культивирования инфицированных клеточных культур, полученная через 21-40 сут после заражения культуры клеток вирусом.

Для получения первичных культур клеток кожи, мышц, легкого и почек берут эмбрионы от вынужденно убитых или абортированных лошадей. Клетки получают из кусочков тканей (1-3 мм) по общепринятой методике трипсинизирования. Дезагрегацию проводят дробно: через каждые 10-15 мин сливают суспендированные клетки в центрифужные флаконы, куда добавляют для инактивации трипсина сыворотку крупного рогатого скота. Далее производят цетрифугирование, надосадочную жидкость сливают, а осадок клеток ресуспендируют в ростовой среде. Клетки высевают в клинские матрасы, производят смену питательной (ростовой) среды на вторые сутки и инкубируют в термостат до формирования полного монослоя (3-5 дней). После формирования полного монослоя культуру клеток используют для заражения вирусом, криоконсервирования или дальнейших пересевов.

Для заражения вирусом отбирают матрасы с полным монослоем клеток, удаляют питательную среду, вносят в каждый матрас по 20-25 мл вирусного материала. Инкубируют в термостате в течение 1,5-2 ч. После этого, не удаляя вирусный материал, вносят питательную среду в объеме 230-250 мл и культуру помещают в термостат. Все сливы вируссодержащей жидкости собирают (отдельно из каждого матраса и каждой культуры), отбирают пробы для определения титра в РДП и ИФА.

Пробы вируса концентрируют ультрафильтрацией в 10 раз. Далее полученные концентрированные вируссодержащие сливы обрабатывают охлажденным до 3-7 o C эфиром, встряхивают 10-20 мин, отстаивают в течение 15-20 мин, эфир сливают. Обработку повторяют дважды. После вторичной обработки эфиром вируссодержащей жидкости для более полного удаления эфира смесь замораживают, затем остатки эфира сливают. Для производства антигена используют вирусный материал со специфической активностью в РДП на +++ и ++++. Полученный антиген, представляющий собой пептид с м.м. 24-26 кД, несущий группоспецифические антигенные детерминанты, с соблюдением правил асептики и антисептики смешивают с защитной средой, расфасовывают, лиофильно высушивают и хранят при температуре 2-8 o C или в замороженном состоянии при температуре от -40 до -50 o C.

Пример 2. Сконцентрированный ультрафильтрацией вирусный материал штамма «3-К-ВНИИТИБП-ВИЭВ» вируса ИНАН лошадей получают аналогично примеру 1. Затем полученный вирус дополнительно очищают последовательно методами скоростного центрифугирования при 100 000 g в течение 3 часов и ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы при 100 000 g. Далее вируссодержащий материал обрабатывают эфиром по примеру 1 методом аффинной хроматографии и получают иммуноэлектрофоретически чистый препарат культурального антигена вируса ИНАН.

Пример 3. Для изготовления специфической сыворотки проводят заражение здоровых лошадей путем подкожного введения штамма N «3-К-ВНИИТИБП-ВИЭВ» вируса ИНАН лошадей. Через 6-8 недель после заражения у животных берут пробы крови на исследование активности и специфичности. При титре преципитирующих антител не ниже 1:4 проходят крововзятие и отделяют сыворотку. Каждую серию сыворотки доводят до рабочего разведения (до разведения, дающего с контрольным положительным антигеном линию преципитации), добавляют антибиотики или консерванты, прогревают, подвергают стерилизующей фильтрации, расфасовывают и лиофильно высушивают.

Пример 4. Составляют набор реагентов для диагностики инфекционной анемии лошадей (индикации антител) в РДП. Тест- система содержит специфический антиген для постановки РДП при ИНАН, полученный по примеру 1, и специфическую сыворотку, полученную по примеру 3. Набор предназначен для серодиагностики инфекционной анемии лошадей в РДП путем обнаружения в крови больных лошадей вирусспецифических преципитирующих антител.

Для исследования специфичности и активности тест-системы используют пробы сыворотки крови от 550 лошадей-продуцентов сыворотки жеребых кобыл (СЖК), от 132 лошадей карантина, от 18 жеребят, заготовленных для биопробы и пробы положительных референс-сывороток (N 1-10), содержащих преципитирующие антитела против антигена вируса ИНАН, полученные от экспериментально зараженных вирусом ИНАН лошадей. Всего исследовано 710 проб крови лошадей. Испытание проводят в сравнении с известным набором диагностикумов ИНАН для РДП, изготовленным из гомогената селезенки.

Исследование проводят в соответствии с «Методикой постановки реакции диффузной преципитации (РДП) для серологической диагностики инфекционной анемии лошадей», рекомендованной ГУВ 05.05.77г.

В результате проведенных исследований установлено: — испытуемые сыворотки крови от 700 лошадей отрицательны в РДП при ИНАН как с известными диагностикумами, так и с диагностикумами, изготовленными из культурального вируса ИНАН; — антиген культурального вируса ИНАН формировал линии преципитации с положительными референс-сыворотками (N 1-10), идентичные линиям преципитации, образованными известным антигеном, но в большем разведении, что свидетельствует о более высокой чувствительности.

Пример 5. Полученный по примеру 2 антиген используют при комплектовании набора реагентов для индикации антигена в модифицированном конкурентном ИФА для адсорбции на планшеты, например, полистироловые 96-ти луночные. Кроме специфического культурального антигена вируса ИНАН для иммобилизации на твердом носителе, тест-система содержит конъюгированный с пероксидазой хрена Ig G к вирусу ИНАН, и субстрат для проведения пероксидазной реакции, например, ортофенилендиамин и перекись водорода. Кроме того, в набор включены детергент — тритон Х-100 или твин-80 и буферные растворы — фосфатно-солевой, натрий бикарбонатный и/или цитратный. Набор содержит положительный и отрицательный контроли, а также желатин.

В качестве положительного контроля используют иммуноэлектрофоретически чистый препарат антигена культурального вируса ИНАН с известной положительной преципитирующей активностью, определенной в РДП с референс-сывороткой. Отрицательный контроль — образцы среды культивирования неинфицированных вирусом клеток эмбриона лошади. Отрицательный контроль подвергают очистке, как и специфический антиген.

Принцип модифицированного конкурентного ИФА основан на конкурентной реакции между антигеном, иммобилизированным на планшетах, и антигеном в исследуемой пробе за связь с иммунопероксидазным конъюгатом.

Анализ проводят по следующей схеме. Исследуемую пробу, содержащую определяемый антиген, смешивают в соотношении 1:1 со специфическими антителами, меченными ферментом. Смесь добавляют к антигену, иммобилизированному на планшетах. После добавления в аналитическую систему субстрата образуется окраска раствора. Разница в интенсивности окраски раствора «нулевой пробы» (отрицательный контроль) и опытной пробы, содержащей антиген, пропорциональна количеству антигена в исследуемой пробе.

Для исследования чувствительности набора реагентов для индикации антигена в качестве аналитической системы используют: иммуноэлектрофоретически чистый препарат культурального антигена вируса ИНАН для адсорбции на платы и построения стандартной кривой с титром преципитирующей активности 1:8-1:16 и содержанием белка 2,5 мг/мл; иммуноглобулин класса G, конъюгированный с пероксидазой из хрена, окисленной перйодатом натрия (содержание пероксидазы в конъюгате — 58856 нг/мл); образцы неинфицированной и инфицированной вирусом ИНАН среды культивирования клеток почки лошади, зашифрованные под номерами 1-15; контрольные образцы N 16-18 инфицированной вирусом ИНАН среды культивирования клеток почки лошади, в которой антиген вируса ИНАН был определен в РДП (титр преципитирующей активности 1:8); в качестве контроля антигена на специфичность используют среду культивирования неинфицированных вирусом клеток почки, которую подвергают очистке, как и специфический антиген.

В ходе испытаний были получены следующие результаты: — иммунопероксидазный конъюгат не давал неспецифической реакции с контрольным антигеном: Д 492 равна 0,055-0,098;
— антиген культурального вируса ИНАН был обнаружен в пробах N 1, 2, 4, 5, 7, 8, 9, 11, 12, 16, 17, 18, что соответствовало образцам инфицированной вирусом ИНАН среды культивирования клеток почки;
— антиген культурального вируса ИНАН не был обнаружен в пробах N 3, 6, 10, 13, 14, 15, что соответствовало образцам неинфицированной вирусом ИНАН среды культивирования клеток почки;
— максимальное разведение, при котором был определен антиген вируса ИНАН, равно 1:256 — 1:512.

Пример 6. Полученный по примерам 1 или 2 антиген используют при комплектовании набора для индикации антител (диагностики инфекционной анемии) в непрямом ИФА для адсорбции на полистироловые планшеты.

Кроме иммобилизированного на твердом носителе культурального антигена вируса ИНАН тест-система содержит конъюгат антивидового иммуноглобулина класса G (Ig G) с пероксидазой хрена, субстрат для проведения пероксидазной реакции (например, ортофенилендиамин и перекись водорода), детергент (тритон Х-100 или твин-80) и буферные растворы — фосфатно-солевой, натрий бикарбонатный и/или цитратный. Набор содержит также положительный и отрицательный контроли и желатин. В качестве положительного контроля используют специфическую сыворотку от экспериментально зараженной вирусом ИНАН лошади с известным титром; в качестве отрицательного контроля — сыворотку крови клинически здоровой лошади.

Принцип непрямого ИФА заключается в том, что исследуемую пробу, содержащую антитела, добавляют к специфическому антигену, иммобилизированному на планшетах, затем последовательно добавляют иммунопероксидазный конъюгат антивидовых Ig G и субстратный раствор ортофенилендиамина и перекиси водорода. После прибавления субстрата образуется окраска раствора, интенсивность которой пропорциональна количеству антител в исследуемой пробе. За титр исследуемой сыворотки считают ее последовательное разведение, дающее Д 492 (Оп) — Д 492 (К) = 0,200.

Для исследования чувствительности и специфичности набора реагентов для индикации антител в качестве аналитической системы используют:
иммуноэлектрофоретически чистый препарат культурального антигена вируса ИНАН для адсорбции на платы;
антивидовой иммуноглобулин класса G, конъюгированный с пероксидазой из хрена;
образцы сывороток крови от неинфицированных и инфицированных вирусом ИНАН лошадей, зашифрованные под номерами 1-15;
контрольные образцы сывороток крови от инфицированных вирусом ИНАН лошадей (N 16-18), в которых антитела были обнаружены в РДП;
в качестве контроля специфичности сывороток используют среду культивирования неинфицированных вирусом клеток почки, которую подвергают очистке, как и специфический антиген.

В ходе испытаний были получены следующие результаты:
— специфические преципитирующие сыворотки проявляли специфическую активность по отношению к иммобилизированному на твердом носителе культуральному антигену вируса ИНАН;
— специфические преципитирующие антитела были обнаружены в пробах N 1, 4, 5, 6, 7, 8, 11, 12, 13, 16, 17, 18, что соответствовало сывороткам, полученным от инфицированных вирусом ИНАН лошадей;
— специфические преципитирующие антитела не были обнаружены в пробах N 2, 3, 9, 10, 14, 15, что соответствовало сывороткам, полученным от здоровых лошадей;
— максимальное разведение, при котором обнаруживались специфические преципитирующие антитела в сыворотках крови, было равно 1:2560 — 1:5120.

Читайте также:  Черная икра польза при анемии

1. Способ изготовления культурального антигена из вируса инфекционной анемии лошадей, отличающийся тем, что штамм вируса инфекционной анемии лошадей N 3-К- ВНИИТИБП-ВИЭВ выращивают в культуре клеток кожи, и/или мышц, и/или легкого, и/или почек эмбриона лошади до накопления вируса в титре 10 5 ИД 50/мл, концентрируют ультрафильтрацией в 10 — 20 раз, отделяют липидную оболочку обработкой эфиром на холоду и получают целевой продукт, представляющий собой пептид с м.м. 24 — 26 кД, несущий группоспецифические антигенные детерминанты.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что после концентрирования ультрафильтрацией вирусный материал дополнительно подвергают очистке методами скоростного центрифугирования и ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы, а после отделения липидной оболочки его повторно очищают аффинной хроматографией.

3. Набор для индикации антител или антигена вируса инфекционной анемии лошадей, отличающийся тем, что содержит культуральный антиген, полученный из штамма вируса инфекционной анемии лошадей N 3-К- ВНИИТИБП-ВИЭВ, и положительный контроль.

4. Набор по п.3, отличающийся тем, что при индикации антител в качестве положительного контроля содержит специфическую преципитирующую сыворотку, полученную от экспериментально заряженных вирусом инфекционной анемии лошадей с известным титром.

5. Набор по п.3, отличающийся тем, что при индикации антител или антигена в иммуноферментном анализе содержит антиген для иммобилизации на твердом носителе, полистироловый планшет и конъюгат иммуноглобулинов класса G с пероксидазой хрена.

6. Набор по п.5, отличающийся тем, что при индикации антител в качестве конъюгата содержит конъюгат антивидового иммуноглобулина класса G с пероксидазой хрена.

7. Набор по п.5, отличающийся тем, что при индикации антигена в качестве конъюгата содержит конъюгат иммуноглобулина класса G к вирусу инфекционной анемии лошадей с пероксидазой хрена.

8. Набор по п.5, отличающийся тем, что дополнительно содержит субстрат для проведения пероксидазной реакции.

9. Набор по п.8, отличающийся тем, что содержит ортофенилендиамин и перекись водорода.

10. Набор по п.5, отличающийся тем, что дополнительно содержит детергент.

11. Набор по п. 10, отличающийся тем, что содержит тритон Х-100 или твин-80.

12. Набор по п.5, отличающийся тем, что дополнительно содержит буферный раствор.

13. Набор по п. 12, отличающийся тем, что содержит фосфатно-солевой, и/или натрий бикарбонатный, и/или цитратный буферный раствор.

14. Набор по п.5, отличающийся тем, что дополнительно содержит отрицательный контроль.

15. Набор по п.14, отличающийся тем, что при индикации антител в качестве отрицательного контроля содержит сыворотку крови клинически здоровой лошади.

16. Набор по п.14, отличающийся тем, что при индикации антигена в качестве отрицательного контроля содержит образцы среды культивирования неинфицированных вирусом клеток эмбриона лошади.

17. Набор по п.5, отличающийся тем, что при индикации антител в качестве положительного контроля содержит культуральный антиген, очищенный по п.2, с известной положительной преципитирующей активностью, определенной в РДП с референс-сывороткой.

18. Набор по п.5, отличающийся тем, что дополнительно содержит желатин.

источник

Поставка диагностических наборов и тест-систем для определения болезней животных для нужд ФГБУ «Ленинградская МВЛ»

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ленинградская Межобластная Ветеринарная Лаборатория»

Чтобы смотреть документы в системе, даже когда
zakupki.gov.ru не работает, нужно оплатить систему.

ИНН 7810323620 КПП 781001001

Тест-система для выявления антител к вирусу Шмалленберга конкурентным методом иммуноферментного анализа (скрининговый формат) (ELISA) (ID Screen® Schmallenberg virus Competition Multi-species). 192 tests. или эквивалент

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Тест-система для выявления антител к Вирусу Птичьего Гриппа (AI) / IDEXX AI Ab (Avian Influenza) 5/solid или эквивалент

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

TEMPO TС -Карта для подсчета общего количества колиформных бактерий (БГКП)

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор эритроцитарного диагностикума для серодиагностики вирусной диареи (ВД) КРС в РНГА

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для выявления антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) методом иммуноферментного анализа

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор диагностический для постановки реакции связывания комплемента (РСК) при листериозе

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Раствор очищающий Diatro. Cleaner, 1 л. Австрия.

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для диагностики болезни Ньюкасла птиц в РТГА

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для выявления антител к возбудителю респираторного микоплазмоза птиц в реакции агглютинации (ВНИИЗЖ или эквивалент)

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Диагностический антирабический иммуноглобулин, меченный флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ – иммуноглобулин), сухой, для диагностики бешенства животных методом иммунофлуоресценции-АМП. 1

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для диагностики хламидиоза сельскохозяйственных животных в РСК и РДСК

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор реагентов для выявления антител к вирусу КЧС методом ИФА «КЧС-СЕРОТЕСТ»

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Тест-система для выявления антител к реовирусной инфекции птиц / IDEXX REO Ab Test (Reovirus) 5/solid или эквивалент

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор реагентов для выявления антител к вирусу репродуктивно-респираторного синдрома свиней иммуноферментным методом «РРСС-СЕРОТЕСТ»

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для выявления антител к вирусу инфекционного ларинготрахеита птиц в ИФА (ВНИИЗЖ или эквивалент)

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

TEMPO АС — Карта для подсчета общего количества аэробных микроорганизмов

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор компонентов для диагностики бруцеллёза в РА, РСК, РДСК

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для серологической диагностики лейкоза КРС в РИД

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор реагентов для выявления антител к вирусу трансмиссивного гастроэнтерита свиней иммуноферментным методом «ТГС-СЕРОТЕСТ»

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор эритроцитарного диагностикума для серодиагностики инфекционного ринотрахеита КРС в РНГА

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор API Listeria -идентификация Listeria

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Дельвотест «Delvotest SP 100-NT»

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для выявления антител к вирусу блютанга иммуноферментным методом «Блютанг — СЕРОТЕСТ»

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор диагностикумов парагриппа-3 КРС в РТГА

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор эритроцитарного диагностикума для определения антител к респираторно-синцитиальной инфекции (PC-инфекции) крупного рогатого скота в РНГА

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для выявления антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) методом иммуно- ферментного анализа (ИФА) Вариант Veri Test-набор №2

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Тест-система VIDAS Listeria monocytogenes II (LMO 2) (60 шт/уп)

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Стандарты мутности МакФарланда (6 стандартов)

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Мастоприм Мастоприм Мастоприм

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для диагностики токсоплазмоза животных в РСК

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Раствор Промывающий Diatro. Rinse, 1 л. Австрия.

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Тест-система для выявления антител к инфекционному бронхиту кур / IDEXX IBV Test (Infectious Bronchitis Virus) 5/solid или эквивалент

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор RapiD 20 E -идентификация Enterobacteriaceae за 4 часа — 25 тестов

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Лизирующий раствор Diatro. Lyse, 1 л. Австрия.

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для диагностики инфекционной анемии лошадей ( ИНАН лошадей) в РДП

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Тест-система для выявления антител к Инфекционной Бурсальной Болезни / IDEXX IBD Ab Test (Infectious Bursal Disease) 5/solid или эквивалент

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Лизирующий раствор для 5 субпопуляций, DIATRO DIFF 5 (или эквивалент)

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Набор для выявления антител к вирусу африканской чумы свиней методом ИФА «АЧС-СЕРОТЕСТ» (INGEZIM PPA COMPAC» СТО 82482744-0011-2008 или эквивалент)

ОКПД2 21.20.23.110 Реагенты диагностические

Участникам, заявки или окончательные предложения которых содержат предложения о поставке товаров в соответствии с приказом Минэкономразвития России № 155 от 25.03.2014

  1. Единые требования к участникам (в соответствии с частью 1 Статьи 31 Федерального закона № 44-ФЗ)
  2. Требования к участникам закупок в соответствии с частью 1.1 статьи 31 Федерального закона № 44-ФЗ

Электронный аукцион признан несостоявшимся.

источник

Инфекционная анемия – ИНАН (Anemia infectiosa equorum) –остро и хронически протекающая болезнь однокопытных, вызываемая РНК-содержащим вирусом,характеризующаяся постоянной или рецидивирующей лихорадкой, септицемическими явлениями геморрагического диатеза, анемией с уменьшением процента гемоглобина и количества эритроцитов, ускоренным их оседанием, нарушением функции сердечно-сосудистой системы, упадком сил и длительным вирусносительством.

Историческая справка. В 1869 г. во Франции была доказана заразительность данной болезни. Карре и Валле в 1904 г. открыли возбудителя инфекционной анемии. В России болезнь описал в 1910г. М.Потудин.

Инфекционная анемия регистрируется в большинстве стран мира: в Северной и Южной Африке, США, Азии, Австралии и ряде государств Европы. В СССР инфекционная анемия довольно часто наблюдалась в 30-х и 40-х годах. В настоящее время болезнь встречается сравнительно редко.

Экономический ущерб. Коневодство стран, где регистрируют инфекционную анемию, терпит большой экономический ущерб. Летальность при первичных вспышках колеблется от 20 до 80%. Особенно большие расходы вызывает проведение довольно сложных мероприятий по профилактике и ликвидации болезни.

Возбудитель болезни — вирус чаще шарообразной формы с выступающими шипами размером 90-200нм, содержится в крови во всех органах и тканях больных животных, имеет двухконтурную оболочку.

Вирус слабо устойчив к теплу и при 60° теряет вирулентность в течение часа. Кипячение разрушает его через 1-2 минуты, солнечные лучи (20-28°) обезвреживают в течение 1-3 часов. При 0-2° холода вирус сохраняется до двух лет. При биотермической обработке навоза он погибает через 30 дней, в моче и навозной жиже сохраняется до 2,5 месяцев. В высушенной крови в комнатных условиях вирус жизнеспособен в течение семи месяцев. 2%-ный раствор едкого натрия обезвреживают вирус через 20 минут, 3%-ный раствор креолина – через 30 минут; 20%-ная взвесь, приготовленная из извести, содержащей 29,5% активного хлора, обезвреживает вирус в сточных водах через трое суток.

Эпизоотологические данные. В естественных условиях инфекционной анемией болеют лошади всех возрастов, ослы и мулы. У жеребят болезнь часто заканчивается смертью. Ослы более устойчивы к инфекционной анемии, чем лошади: у них болезнь протекает подостро и хронически.

Источником возбудителя инфекции являются больные лошади. Особенно опасны животные с острым течением болезни и хроники в период обострения болезни, так как вирус в организме находится в наибольшей концентрации. Источником возбудителя инфекции могут быть также лошади с латентными формами болезни, у них вирусносительство может продолжаться в течение 7-10 и даже 18лет.

Из организма больной лошади вирус попадает во внешнюю среду с секретами и экскрементами, содержащими белок: мочой, калом, носовой слизью, конъюнктивальным секретом, молоком. Загрязненные выделениями больных корма, вода, навоз, и другие субстраты могут быть факторами передачи возбудителя инфекции.

В организм восприимчивых животных вирус попадает через кожу, слизистые оболочки, пищеварительный тракт. Возможно заражение при случке. Массовым источником распространения инфекции являются кровососущие насекомые, особенно слепни, мухи-жигалки в слюне которых вирус сохраняется 3-4 часа.

Инфекционная анемия чаще встречается в лесисто-болотистых местностях. Здесь она приобретает стационарный характер и отсюда заносится вирусносителями в другие зоны. Два главных фактора определяют понижение резистентности лошадей к инфекционной анемии и распространению этой болезни.

1. В лесисто-болотистых местностях на кислых неполноценных почвах произрастают бедные каротином и минеральными солями растения. Лошади даже летом получают неполноценные корма. Все это проводит к понижению резистентности организма.

2. В указанных местностях летом размножается большое количество кровососущих насекомых (гнус), которые переносят вирус инфекционной анемии от больных животных здоровым. Непрерывно нападая на лошадей, они вызывают сильное перераздражение нервной системы и тем самым резко ослабляют устойчивость организма к инфекционному заболеванию.

Хотя заболевание лошадей инфекционной анемией возможно в течение всего года, зимой и весной бывают обычно спорадические случаи болезни. Иногда они являются результатом непосредственного заражения, но чаще это обострение хронического или латентного течения болезни, вызванные плохими условиями содержания или непрерывной эксплуатацией лошадей.

Массовый лет жалящих насекомых (июль—август) определяет летне — осеннюю сезонность инфекционной анемии, которая возникает среди лошадей чаще на пастбище, но иногда и в конюшнях в виде ограниченных и почти одновременно появляющихся вспышек в тех или иных местах. Массовое заболевание лошадей наблюдается преимущественно в годы с жарким и сухим летом, когда идет процесс обильного размножения жалящих насекомых.

Энзоотия инфекционной анемии продолжается 3-5 месяцев. В начале выделяются животные с острым и даже сверхострым течением болезни. В дальнейшем начинают приобретать хроническое течение и латентные формы. Несоблюдение карантинных мер, а также трудности с выявлением скрытых носителей вируса при перемещении из одних зон в другие крупных партий лошадей ведут к эпизоотическому распространению болезни.

В стационарно неблагополучных пунктах, если туда не поступают лошади из других хозяйств, через 1-2 года случаев явного заболевания не наблюдается. Лошади становятся иммунными и в основной своей массе –вирусносителями (нестерильный иммунитет).

Патогенез. В организм восприимчивых животных вирус проникает в кровь главным образом парентерально. С током крови вирус попадает во все органы и ткани, при этом особенно интенсивно размножается в костном мозге и крови.

В результате раздражения вирусом нервных рецепторов в организме животного происходит рефлекторное включение механизмов защиты.

Организм отвечает лихорадкой, усилением фагоцитарной деятельности клеток ретикулоэндотелиальной системы. Эритроциты, нагруженные вирусом, поглощаются клетками РЭС, но уничтожение вируса при этом не происходит.

Основной симптом болезни – анемия — возникает вследствие угнетения эритропоэза, а также лизиса эритроцитов, подвергшихся воздействию вируса и фагированных клетками РЭС. При этом эритробластическая группа клеток при остром течении инфекционной анемии уменьшается с 40 до 4,6%, а гистиоцитарная группа, клетки которой, становясь макрофагами, пожирают эритроцитов, увеличивается с 3 до 40%.

Что касается угнетения эритропоэза, то этот процесс можно объяснить недостатком в организме цианкоболамина (витамина В12), без которого невозможен нормальный процесс кроветворения.

Вирус инфекционной анемии вызывает сильнейшее раздражение ретикулоэндотелиальной системы организма. Результатом этого является интенсивное размножение и накопление клеток РЭС не только в селезенке, но и в печени, почках и других органах. Как известно, старые эритроциты разрушаются в селезенке, а железосодержащий пигмент эритроцитов-гемосидерин — возвращается для утилизации в красный костный мозг. При инфекционной анемии селезенка, где бурно размножается лимфоидная ткань, постепенно прекращает переработку отмерших эритроцитов. Компенсаторно на себя эту функцию берут другие органы: печень, почки, легкие, клетки РЭС в которых в большом количестве отлагается гемосидерин. Происходит нарушение кругооборота железа в организме больного животного.

Недостаток кислорода в тканях (следствие анемии) вызывает дистрофические и некробиотические процессы в органах. Особенно сильно при этом страдают сердце и печень. Защитной стороной этого процесса является лимфоидная реакция. Дело в том, что лимфоидные клетки являются как раз тем строительным материалом, используя который организм восстанавливает нарушенную целостность ткани. Однако чрезмерная «защита», например в печени, ведет к противоположному результату. Массовое скопление лимфоидных клеток в просветах капилляров и вокруг них вызывает расстройство питания органа. Это сопровождается дальнейшими нарушениями метаболизма и интоксикацией организма веществами, которые обычно обезвреживает печень.

Токсическое действие вируса вызывает гемолиз части эритроцитов в кровяном русле, что не оказывает своего существенного влияния на понижение общего количества эритроцитов. Отсутствие у больных анемией лошадей выраженной желтухи, незначительное увеличение количества билирубина в крови свидетельствует против гемолитической анемии.

Существенное влияние на характер течения болезни и ее исход оказывает состояние реактивности организма. У лошадей в возрасте от 6 до 10лет, нервная система которых сравнительно сильная, отмечается наименьшей летальностью и наибольшим процентом стертых форм болезни. У лошадей моложе этого возраста и старых летальность от инфекционной анемии относительно более высокая.

Усиление виремии ведет к приступам лихорадки.

Течение и симптомы болезни. Инкубационный период при инфекционной анемии в среднем 10-30 дней. В некоторых случаях инкубация может сокращаться до 5дней и растягиваться до 3 месяцев.

Основными признаками болезни являются: лихорадка, слабость и истощение лошади, расстройства сердечной деятельности и изменение картины крови. В зависимости от степени проявления всех этих признаков и быстроты развития процесса различают сверхострое, острое, подострое, хроническое и латентное течение болезни.

Сверхострое течение болезни характеризуется лихорадкой, гастроэнтеритом (геморрагическим), сердечной слабостью, асфиксией. Общее состояние животного тяжелое, оно с трудом передвигается, иногда наблюдается паралич зада. Смерть лошади наступает в течение нескольких часов или через 1-2 дня. В этих случаях болезнь часто смешивают с отравлением или с сибирской язвой.

Читайте также:  Железодефицитная анемия список используемой литературы

Острое течение болезни сопровождается быстрым подъемом температуры тела животного до 40-41° и выше. Наблюдается угнетение, но бывает и легкое возбуждение (эйфория). Отмечается гиперемия конъюнктивы и слизистых оболочек носа, рта. Изменения в органах дыхания обычно отсутствуют. Ослабление сердечной деятельности нарастает постепенно. К концу болезни пульс учащен до 100 и больше в минуту, возникают перебои. Сердечный толчок усилен.

Нередко у больной лошади бывают колики, появляется понос, даже с примесью крови, иногда носовое кровотечение. Несмотря на сохраняющийся аппетит у лошадей быстро развивается исхудание.

По мере развития болезни слизистые оболочки глаз, носа, рта, а у кобыл и влагалища становятся бледными, набухшими, маслянистыми, на них часто появляются множественные точечные кровоизлияния. Особенно характерны кровоизлияния на третьем веке и на слизистой возле уздечки языка.
Ослабление сердечной деятельности вызывает у лошадей застойные отеки в области живота, препуция, конечностей. Больные лошади стоят с низко опущенной головой. При движении появляется сильная одышка и сердцебиение, походка становится шаткой.

Острое течение болезни характеризуется быстро развивающейся анемией.

Количество эритроцитов резко снижается до 2-3 и даже 1млн. в 1мм³, кровь становится водянистой и плохо свертывается. Количество гемоглобина уменьшается до 20-30%, реакция оседания эритроцитов (РОЭ) ускорена: 70-80 делений в первые 15 минут. Артериальное давление понижено.

Температура тела на протяжении всего времени болезни остается высокой и только в отдельные дни опускается близко к норме. Длительность острой анемии от 3 до 15 дней, но иногда и месяц.

Подострое течение чаще всего при инфекционной анемии является продолжением острого переболевания лошадей, но может возникнуть и самостоятельно. Подострое течение болезни длится 2-3месяца, в течении которого лихорадка чередуется с периодами, когда температура тела приходит к норме (ремиссия). Бывает до 10 приступов лихорадки продолжительностью 3-5дней. Ремиссии продолжаются 4-15 дней.

В период рецидивов у больных наблюдаются по существу те же признаки, что и при остром течении болезни. Во время ремиссий эти признаки постепенно исчезают, наступает значительное улучшение общего состояния больного. При этом, чем чаще и продолжительнее приступы лихорадки, тем быстрее угасают защитные силы организма и наступает смерть. Исследование крови во время рецидивов дает такие же результаты, что и при остром течении болезни.

Хроническое течение болезни может возникнуть самостоятельно, но чаще всего является продолжением подострого течения. Приступы лихорадки при этом становятся реже и бывают кратковременными. Температура тела повышается до 40-41°, но иногда незначительно. В период рецидивов болезней у больных лошадей отмечается быстрая утомляемость, одышка, сердцебиение, потливость, дрожание мускулатуры. При исследовании крови выявляются следующие изменения: число эритроцитов уменьшается на 1-2 млн., РОЭ ускорена – в первые 15 минут 60-65 делений.

Для хронического течения инфекционной анемии лошадей характерны непродолжительные подъемы температуры тела. Длительность рецидивов болезни 1-3 дня, продолжительность ремиссий 2-3 недели, но иногда и несколько месяцев. При хорошем кормлении и нормальной эксплуатации лошади с хронической анемией могут жить и работать в течение многих лет. Разумеется, таких лошадей, ввиду того, что они являются вирусносителями, можно использовать только в специальных, надежно изолированных хозяйствах, освобождая их во время приступа болезни от работы.

Латентное течение болезни наблюдается у резистентных лошадей и характеризуется одиночными взлетами температуры тела через длительные промежутки времени (несколько месяцев). Такие лошади внешне являются здоровыми, но вирусносителями, и это обстоятельство определяет отношение к ним как к опасным источникам возбудителя инфекции.

Патологоанатомические и гистологические изменения. При вскрытии трупов животных, павших от остро или подостро протекавшей анемии, обнаруживается картина сепсиса. Обращает на себя внимание наличие множественных точечных, пятнистых и полосчатых кровоизлияний на серозных и слизистых оболочках, а также в паренхиматозных органах. Слизистые оболочки глаз, носа, рта и подкожной клетчатки бледны, иногда имеют желтушный оттенок. Лимфатические узлы увеличены и гиперемированы, особенно портальные и селезеночные.

Селезенка при остром течении инфекционной анемии увеличена в 2-3 раза, темно-красного цвета, имеет дряблую консистенцию, поверхность разреза бугристая. При хроническом течении болезни селезенка также несколько увеличена, зерниста. На разрезе видны серовато-белые возвышения (саговость).

Печень при острой анемии увеличена, края ее закруглены. При хроническом течении болезни она имеет нормальную величину, иногда атрофирована, ясно выражена дольчатость. В том случае, если лошадь пала в результате обострения болезни, то печень может быть сильно увеличенной, на разрезе иметь мускатный рисунок (периферия долек серо-желтая, центр красно-коричневый). Сердце увеличено в объеме, под эпикардом и эндокардом обнаруживают кровоизлияния. Сердечная мышца нередко пронизана сероватыми очажками. Почки увеличены в объеме, под фиброзной капсулой и на разрезе встречаются многочисленные точечные кровоизлияния.

В желудочно- кишечном тракте обнаруживают кровоизлияния, как на слизистой оболочке, так и под серозными покровами.

При хроническом течении инфекционной анемии кровоизлияния выражены в меньшей степени, зато встречаются такие характерные для затяжного течения болезни изменения, как рубцы на сердце, индурация (уплотнение) легких, резко выступающие белые фолликулы и гранулированность в селезенке, тромбы в разных сосудах.

При вскрытие трупов лошадей павших в результате повторного приступа болезни, нередко кровоизлияния обнаруживаются одновременно с рубцами в миокарде, что указывает на ранее перенесенные приступы болезни.

При гистологическом исследовании изменения находят во всех паренхиматозных органах и центральной нервной системе.

В легких наблюдается утолщение межальвеолярных перегородок, инфильтрация их лимфоидными клетками, моноцитами, отложение в их цитоплазме гемосидерина.

В миокарде при остром течении имеются кровоизлияния, инфильтрация лимфоидными клетками, моноцитами, гистиоцитами. При хроническом течении, кроме этих клеточных скоплений, встречаются участки размножения фибробластов и образование соединительнотканных рубцов.

В печени наблюдаются дистрофические процессы, в печеночных клетках-пролиферация купферовских клеток и клеток межуточной ткани. Степень проявления этих изменений в различных случаях не одинакова: в одних случаях дистрофические процессы в печеночных клетках отсутствуют, выражено лишь равномерное размножение купферовсих клеток и заполнение капилляров печени лимфоидными клетками, гистиоцитами и моноцитами, содержащими в своей цитоплазме остатки разрушающихся эритроцитов и железосодержащий пигмент, в других — отмечается гнездное размножение клеток ретикулогистиоцитарной системы и отложение в них гемосидерина, в третьих, кроме размножения клеток ретикулогистиоцитарной системы и отложения в них гемосидерина, наблюдаются значительные дистрофические изменения в печеночных клетках некротический распад их, который сильнее выражен вокруг центральных вен.

В почках, кроме кровоизлияний, обнаруживают инфильтрацию лимфоидными клетками и гистиоцитами.

В селезенке при остром течении болезни отмечаются вначале значительные скопления эритроцитов, а в более поздний период-замещение красной пульпы лимфоидными клетками (лимфоцитоз селезенки), уменьшение в ней гемосидерина вплоть до полного его исчезновения.

В головном мозгу муфтообразные скопления круглоядерных клеток вокруг сосудов.

Диагноз на инфекционную анемию ставят на основании анализа комплекса данных. Учитывают эпизоотологические особенности болезни, результаты клинического и гематологического исследований, патологоанатомические и гистологические изменения.

Если инфекционная анемия в хозяйстве установлена, дальнейшая индивидуальная диагностика болезни основывается на клинических и гематологических исследованиях. Эпизоотологические данные собирают непосредственно в хозяйстве. При этом учитывают давность заболевания, характер болезни, пути заноса возбудителя инфекции, динамику заболеваемости и падежа лошадей за несколько предшествующих лет.

Принимают во внимание, что массовые вспышки инфекционной анемии наблюдаются исключительно летом и осенью (июль—сентябрь), а спорадические случаи — в любое время года. Заболевают лошади всех возрастов.

При клиническом исследование учитывают различия течения болезни, рецидивирующий тип лихорадки при подострой и хронической анемии, кровоизлияния на слизистых оболочках, исхудание при нормальном аппетите, шаткость зада, отеки. У больных лошадей повышена возбудимость сердца, что устанавливается функциональной пробой: пробег 50м, подсчет пульса каждые 5 секунд в течение 0,5 минуты. Результат от деления первой цифры подсчета на последнюю цифру у больного анемией лошади должен равняться 2,5- 3.

Для серологического исследования на ИНАН разработаны РСК, РДП, РИФ, РТГА, ИФА и ПЦР. Однако практическое применение в ветлабораториях нашла РДП, при помощи, которой выявляются лошади с острым, хроническим и латентным течением болезни. Реакцией РДП обнаруживают вирусносителей даже через 4-5 лет после переболевания.

Гематологические исследования больных лошадей включают: определение количества гемоглобина, подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов, РОЭ, определение лейкоцитарной формулы крови. Исследование крови производят через каждые три дня во время лихорадочных приступов и не реже одного раза в десять дней в периоды ремиссий.

Форменные элементы крови Показатели крови
Здоровые лошади
Нормальной упитанности
Больные инфекционной
анемией
Эритроцыты От 5 до 9млн. 4млн. и ниже
Гемоглобин 45 и выше единиц по Сали 30-18
Лейкоциты 7000-10 000 Без изменений
Лейкоцитарная формула (лимфоциты) 25%-35% 60-75%

По Я.Е.Колякову (1945), осаждение эритроцитов при удовлетворительной упитанности лошади в первые 15 минут на 70 и более делений с уменьшением столба эритроцитов через час осаждения до 80 и более делений, весьма вероятно, связано с заболеванием лошади инфекционной анемией, при исключении других заболеваний.

При анализе лейкоцитарной формулы следует учитывать, что у здоровых жеребят в возрасте до 4-6 месяцев может иногда наблюдаться повышенный процент лимфоцитов (до 60%).

Дополнительным методом диагностики инфекционной анемии является исследование костномозгового пунктата в динамике болезни. Наиболее характерные изменения появляются во время лихорадки: резкое уменьшение эритробластической группы клеток и увеличение количества клеток гистиоцитарно-моноцитарной группы. В период длительных ремиссий при хроническом течении болезни состояние клеток костного мозга не отличается от такового у здоровых лошадей.

Дифференциальный диагноз. При постановке диагноза на инфекционную анемию нужно исключить сходные по клиническому течению болезни- пироплазмоз, нутталлиоз, трипонозамозы (случная болезнь, суауру), лептоспироз, грипп. Для пироплазмоза характерна сезонность: апрель-май или август – сентябрь. Болезнь протекает остро; при исследовании крови обнаруживают пироплазмы. При нутталиозе максимум больных выделяется в июне; течение острое и подострое. В крови обнаруживаются нутталии. У больных гемоспоридиозами лошадей наблюдается резкая желтушность слизистых оболочек, имеющая стойкий характер; при инфекционной анемии она отсутствует. При гемоспоридиозах с первых же дней наблюдается резкое учащение дыхания — одышка (отек легких); у больных инфекционной анемией со стороны органов дыхания, как правило, особых отклонений от нормы нет. Наконец, при гемоспоридиозах болезнь у жеребят протекает латентно, а при инфекционной анемии — тяжело, сопровождаясь высокой летальностью.

Лептоспироз исключается на основании исследования сыворотки крови больных по реакции микроаглютинации и лизиса, отсутствия лейкоцитоза и лептоспир в моче. Грипп лошадей характеризуется быстрым распространением болезни в конюшне, но протекает благоприятно. При глистных анемиях, вызванных, например, параскаридозом у жеребят, лихорадки обычно не бывает. Копрологическое исследование позволяет выяснить причину страдания.

В особенно затруднительных случаях, когда не хватает комплекса данных, диагноз на инфекционную анемию устанавливают при помощи биологической пробы. Для этой цели используют 2-3 жеребят старше 6 месяцев. Их предварительно в течение месяца исследуют (измерение температуры тела, гематологические и копрологические исследования), исключают нутталиоз, пироплазмоз, сап, паратиф, бруцеллез. Затем жеребятам вводят подкожно 100мл профильтрованной сыворотки от подозрительных по заболеванию инфекционной анемией лошадей. Если нет характерных признаков болезни, жеребят исследуют в течение трех месяцев. Положительной считается биопроба при наличии у подопытных жеребят свойственных инфекционной анемии клиники — гематологических и патогистологических показателей. Если результаты исследований неясны, то рекомендуется производить пассаж на одном жеребенке. Тогда исследование продолжают еще 1,5-2 месяца.

Лечение больных инфекционной анемией лошадей не разработано т.к. почти всегда было безрезультатно в том смысле, что никакими лекарственными препаратами не удавалось стерилизовать организм от вируса. В специальных хозяйствах (анемохозяйства) при наличии хорошего ухода, кормления и правильной эксплуатации хронически и латентно больные лошади могут в течение ряда лет оставаться работоспособными. Во время рецидивов болезни их освобождают от работы. По мере восстановления сил после рецидива болезни лошадей постепенно втягивают в работу. В настоящее время анемохозяйств в нашей стране нет.

Иммунитет. При ИНАН иммунитет нестерильный (премуниция). В крови лошадей обнаруживают комплементсвязывающие, вируснейтрализующие и преципитирующие антитела. Вирус имеет несколько гликопротеидных и полипептидных антигенов. Внутренний из них, Р-24,выявляется в РСК, РИД и РИФ. Во Франции изготовлена вакцина против ИНАН.

Профилактика и меры борьбы основаны на своевременной диагностике и предупреждении заноса вируса в благополучные хозяйства и проводятся в соответствии с инструкцией о мероприятиях по предупреждению и ликвидации инфекционной анемии лошадей, Утвержденной Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 20 декабря 1982 года.

Мероприятия по профилактике заболевания однокопытных животных инфекционной анемией лошадей.

  • При комплектовании хозяйств однокопытными животными их необходимо приобретать из пунктов, благополучных по инфекционной анемии лошадей.
  • С целью предупреждения распространения болезни однокопытные животные подлежат исследованию на инфекционную анемию методом диффузной преципитации (РИП). Исследования животных проводят:
    • при их выводе за пределы хозяйств для племенных и пользовательных целей (не более чем за 30 дней до отправки);
    • при поступлении в хозяйство (в период карантинирования). Лошадей, поступивших на предприятия биологической промышленности в качестве доноров или используемых в хозяйствах для получения сыворотки крови и желудочного сока, исследуют 2-х кратно с интервалом в 30 дней, в дальнейшем -2 раза в год: весной-до начала и осенью — по окончании лета кровососущих насекомых;
    • при использовании кобыл для получения кумыса — перед постановкой на раздой.
  • Ветеринарные специалисты и руководители хозяйств, при подозрении на заболевание животных инфекционной анемией принимают меры к их изоляции и уточнению диагноза. На предприятиях биологической промышленности прекращают иммунизацию и получение крови от лошадей-продуцентов.

При установлении диагноза на инфекционную анемию лошадей хозяйство (конюшню, ферму, отделение, биопредприятие, населенный пункт) постановлением Губернатора области объявляют неблагополучным по этой болезни и в нем вводят ограничения.

По условиям ограничений запрещается:

  • ввод на территорию хозяйства и вывод за его пределы однокопытных животных;
  • перегруппировка восприимчивых животных без ведома главного (старшего) ветеринарного врача, обслуживающего это хозяйство;
  • реализация полученных от лошадей сывороточных препаратов без их обеззараживания от вируса инфекционной анемии.

Все поголовье лошадей, ослов, мулов и лошаков неблагополучного хозяйства подвергают клиническому осмотру исследуют серологически на инфекционную анемию методом РДП.

Животных, клинически больных инфекционной анемией, убивают и направляют на техническую утилизацию.

Животных, давших при серологическом исследовании на инфекционную анемию положительные или дважды с интервалом в 7-10 дней сомнительные результаты и не имеющих клинических признаков болезни (повышенную температуру тела, отеки, истощение), убивают на санитарной бойне. Мясо, признанное годным в пищу, направляют на обезвреживание проваркой согласно действующим Правилам ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов.

Шкуры дезинфицируют в соответствии с действующей Инструкцией по дезинфекции сырья животного происхождения и предприятий по его заготовке, хранению и обработке.

Голову, кости и внутренние органы утилизируют.

Остальных однокопытных животных неблагополучного хозяйства, отрицательно реагировавших при исследовании методом РДП на инфекционную анемию, вновь исследуют этим методом с интервалом в 30 дней до получения 2-кратного отрицательного результата по группе.

До оздоровления хозяйства, отрицательно реагирующие при исследовании на инфекционную анемию животные могут быть использованы на работах в пределах неблагополучного пункта.

Молодняк, полученный от положительно реагирующих при серологическом исследовании маток, проверяют в 6-месячном возрасте на инфекционную анемию в РДП 2-кратно с интервалом в 30 дней. При отрицательных результатах 2-кратного исследования его считают здоровым; реагирующий сомнительно при первом или втором исследовании проверяют повторно через 7-10 дней. Положительно и дважды сомнительно реагировавшие животные подлежат убою на санитарной бойне.

На предприятиях биологической промышленности клинически здоровых лошадей-продуцентов, отрицательно реагировавших на инфекционную анемию РДП, продолжают использовать в качестве доноров и одновременно их проверяют дополнительно на это заболевание методом групповой биопробы. Группы не должны превышать 15 голов.

Дезинфекция конюшен, территории вокруг них, упряжи, предметов ухода и навоза при установлении инфекционной анемии проводят в соответствии с действующей Инструкцией по ветеринарной дезинфекции, дезинвазии, дезинсекции и дератизации.

Ограничения с неблагополучного по инфекционной анемии пункта снимают в установленном порядке после убоя больных и положительно реагирующих при исследовании в РДП животных, получения 2-кратных с интервалом в 30 дней отрицательных результатов серологических исследований остального поголовья однокопытных животных в пункте (3-кратных отрицательных результатов серологических исследований и отрицательных результатов групповой биопробы на предприятиях биологической промышленности), а также проведения заключительных мероприятий.

источник